钩吻炒制工艺及化学成分的初步研究

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目的:通过对现有砂炒炮制设备的改进以及钩吻炒制工艺的研究,获得稳定可控、低毒高效的钩吻砂炒炮制饮片,为进一步开发钩吻药材资源,提供理论基础。方法:为了克服砂炒炮制工艺中存在的一些不可控因素,应用砂炒炮制工艺的原理,对现有的传统砂炒炮制工艺进行改进,提高炮制品的质量。采用高温加热法,以镇痛药效、急性毒性为评价指标,在单因素试验基础上,选择炮制时间、炮制温度为自变量,采用星点设计(Central Composite Design)-响应面(Response Surface Methodology)法优选钩吻炮制工艺的研究。在优选的炮制工艺基础上,采用紫外分光光度的方法,以钩吻总生物碱为研究指标,利用正交实验设计的方法优化钩吻炮制品的醇提取工艺,并利用紫外分光光度法及HPLC的方法,对钩吻炮制以后的化学成分进行初步的研究。结果:利用自制设备制备炮制品,容易控制炮制温度,使药材受热均匀,明显提高炮制的稳定性和重复性,可以用于传统炮制工艺中炒制以及烫制炮制品的制备。钩吻生品利用改进后的设备在钩吻190-230℃温度下,经过10-60分钟的炮制后,经炮制以后减毒明显降低,仍然保留一定的镇痛效应,对炮制品的外观、毒性和镇痛药效综合考虑,在炮制温度200-220℃,炮制时间在10-20min内进行最佳工艺优选,得到钩吻的最佳炮制工艺,炮制温度210℃,炮制时间15min。通过钩吻炮制品乙醇提取物的最佳炮制工艺研究发现,钩吻炮制品粉碎后,采用6倍体积的95%乙醇提取3次后,总生物碱含量最高;钩吻炮制品的乙醇提取物均可以与苦味酸、碘化铋钾及硅钨酸试剂发生沉淀反应;经全波长紫外扫描后发现钩吻炮制品与生品的全波长紫外图轮廓相似,精细结构不完全相同,总生物碱含量约减少45.36%;色采用依利特色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-5mmol醋酸铵-冰醋酸(PH=3)流动相梯度洗脱;检测波长:254 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL的色谱条件下。经高效液相色谱仪分析发现,炮制前后化学成分发生明显的变化,原有化学成分比例的变化,部分化学成分的消失及新成分的产生。结论:利用改进后的设备制备炮制品,可以提高炮制品的稳定性和重复性。优选的钩吻炮制工艺稳定、简便、可行,预测性良好,充分体现了钩吻经炮制后减毒存效的作用。初步化学成分研究结果表明,钩吻经炮制后总生物碱含量降低,部分生物碱的化学结构发生改变,以及炮制后原有的化学成分比例也发生了明显的变化,这些有可能是钩吻炮制“减毒存效”的物质基础。
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