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突尼斯软籽石榴因其早果丰产、果形美观、裂果轻、皮薄、味甜多汁，尤其是核仁极软、成熟期恰逢仲秋，成为目前黄河以南石榴栽培中的优良品种，但因其抗寒能力较差，在低温年份时，生产栽培中的易出现冻害现象，这已经成为不容忽视的问题。运用传统的育种手段进行品种的改良，由于受到周期长、自交不亲和及基因间的紧密连锁等因素的影响而导致育种进程缓慢。基因工程的出现，成为实现目标性状改良的一种快速的有效途径。本试验利用农杆菌介导的遗传转化体系，将抗寒基因转入到突尼斯软籽石榴中，以期获得抗寒的新种质。主要的研究结果如下：1.对LBA4404和EHA105两种农杆菌菌株遗传转化力的研究，结果表明LBA4404侵染能力较强，得到的转化苗数多于EHA105菌株，但就污染率和褐化率来说，EHA105菌株的污染率和褐化率则低于LBA4404菌株。但对于最佳的农杆菌菌株的优化还需要进一步实验研究。2.通过对遗传转化过程中共培养温度的研究，结果表明在19°C的共培养条件下，叶片和愈伤组织的污染率和褐化率得到明显改善，其中愈伤组织经过共培养培养和筛选培养之后，得到抗性愈伤组织和抗性芽，因此，适宜突尼斯软籽石榴遗传转化的共培养温度为19°C3.分别以突尼斯软籽石榴的叶片、愈伤组织作为外植体进行抗寒基因的遗传转化，研究结果表明，突尼斯软籽石榴的愈伤组织作为外植体，进行农杆菌的侵染，得到了抗性愈伤组织，并有转化苗的分化。因此，愈伤组织为良好的外植体侵染材料。4.优化选择转化苗再生体系，结果表明侵染过的愈伤组织第一次继代的最佳培养基为：MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.5mg/L+GA0.3mg/L+KT1.0mg/L+PVP1.0g/L+Kan50mg/L+Cef500mg/L，抗性芽伸长生长的最佳培养基为：MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+GA0.3mg/L+KT1.0mg/L+PVP1.0g/L+Cef500mg/L+Kan50mg/L。5.提取LBA4404农杆菌菌株的质粒DNA，经过1%琼脂糖凝胶电泳扩增出条带，得到的质粒DNA可以用于抗性愈伤组织和抗性芽的检测。