目的：糖尿病肾病(DN)是糖尿病的重要微血管并发症之一，多数研究认为20％～30％的糖尿病患者发生DN。DN早期的病变特点为肾小球基底的增厚以及细胞外基质(ECM)的增生，从而导致肾小球的高滤过和微量白蛋白尿。系膜细胞在这些病理过程中起着重要作用。尽管严格的控制血糖、血压以及血脂可以减少DN发生的危险性，但仍然不能完全阻止糖尿病患者从早期DN进展至终末期肾病(ESRD)。DN的发病机制仍未完全清楚，目前研究证实，高血糖、血流动力学、细胞因子等多种因素参加与了DN的发生。近年来，转化生长因子-β(TGF-β)/smad信号通路在DN发病中的作用日益受到关注，研究证实了TGF-β/smad信号转导通路参与了ECM沉积，DN肾脏纤维化形成的过程。而泛素-蛋白酶体途径(UPP)是一种细胞内蛋白质的重要的特异性降解途径，泛素介导的蛋白酶体降解是调节TGF-β/smad信号转导功能的重要机制之一，在UPP中E3泛素连接酶Smurf2可选择性泛素化降解TGF-β下游信号Smad蛋白。但糖尿病时UPP如何调节TGF-β/smad信号通路，参与DN发病，尚未见文献报道。为进一步明确Smad蛋白在DN时的变化以及UPP在糖尿病Smad信号中的作用，本研究观察了高糖刺激后大鼠肾小球系膜细胞(GMC)胞内信号蛋白Smad和Smad泛素化调节因子-Smurf的表达，并以蛋白酶体特异性抑制剂MG132作为泛素-蛋白酶体途径阻断剂，初步探讨了泛素化降解及smad信号蛋白在糖尿病肾病发病机制中的作用，为DN的防治寻求新的理论依据。 方法：将体外培养的大鼠HBZY-1肾小球系膜细胞株分为7组。分别设： ①正常对照组(葡萄糖浓度5.6mmol/L)； ②20mmol/L高糖组； ③30mmol/L高糖组； ④甘露醇组(24.4mmol/L甘露醇作为渗透压对照)； ⑤正常组加MG132(1μmol/L)组； ⑥30mmol/L高糖加MG132组； ⑦30mmol/L高糖加二甲基亚砜(1μmol/LDMSO)组。 用细胞免疫荧光染色法及激光共聚焦显微镜检测各组系膜细胞泛素连接酶Smurf2及TGF-β下游信号蛋白Smad2/3、Smad7的表达。 结果： 1、正常组系膜细胞Smurf2、Smad2/3蛋白表达较弱，Smad7蛋白表达较强。 2、高糖组系膜细胞Smurf2、Smad2/3表达较正常糖组均增强(P<0.05)，Smad7表达减弱(P<0.05)，甘露醇组系膜细胞较正常糖组均无明显变化(P>0.05)。 3、高糖组(30mmol/L)加入MG132后，系膜细胞Smurf2、Smad2/3表达均减弱，Smad7表达增强，与正常组接近。 结论： 1、高糖可诱导肾系膜细胞Smurf2、Smad2/3表达增强，Smad7表达减弱。 2、泛素蛋白酶体的抑制剂可阻止高糖所导致的系膜细胞Smurf2、Smad2/3表达增强和Smad7表达减弱。提示UPP参与了糖尿病肾病Smad通路的信号调节。