论文部分内容阅读
目的：在体外环境中，研究临床常用结肠癌化疗药物5-氟尿嘧啶（5-Fu）、奥沙利铂（L-OHP）、伊立替康（CPT-11）、顺铂（DDP）和吉西他滨（GEM）对人结肠癌低分化细胞株人结肠癌细胞HT-29、人结肠腺癌细胞LS174T和人结肠癌细胞HCT116的抗增殖作用，明确结肠低分化腺癌对化疗药物的敏感性并初步筛选出耐药细胞株，为研究临床化疗药物对结肠癌低分化腺癌的化疗敏感性药物及阐明天然耐药机制提供实验依据。方法：体外培养人结肠癌低分化腺癌HT-29、LS174T和HCT116，应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定对照组(未加药)和给予不同浓度5-氟尿嘧啶（5-Fu）、奥沙利铂（L-OHP）、伊立替康（CPT-11）、顺铂（DDP）和吉西他滨（GEM）干预组48h后细胞增殖的变化，并计算出生长抑制率（IR）和半数抑制浓度(IC50值)，倒置显微镜下观察细胞形态。结果：1、倒置显微镜下观察细胞形态，与对照组相比实验组（不同浓度化疗药物干预组）细胞，随药物浓度增加，对细胞的抑制作用增强，悬浮细胞增多，贴壁细胞数量减少，折光性差，细胞体积缩小、变圆、活力差。2、MTT结果显示不同浓度的5种化疗药物作用于3种人结肠癌低分化腺癌细胞株与对照组比较均有不同程度的抑制作用，差异均有统计学差异（P＜0.05），且随个药物浓度的增高而抑制率增高，呈剂量依赖型，且均存在有效抑瘤浓度范围。3、通过上述各化疗药物对3种人结肠癌低分化腺癌细胞株的抑制率计算各药物半数抑制浓度（IC50值），发现L-OHP和GEM的IC50值差异无统计学意义（P＞0.05），而5-Fu、CPT-11和DDP的IC50值差异有统计学意义（P＜0.05）。4、比较不同细胞株间IC50值，发现人结肠癌细胞HCT116与其他细胞株的IC50值差异有统计学意义（P＜0.05），即人结肠癌细胞HCT116对以上5种化疗药物均较敏感。结论1、5种不同浓度的临床常用结肠癌化疗药物对3种结肠癌低分化腺癌细胞株均作用48h后，呈现不同程度的抑制作用，其抑制趋势呈剂量依赖型，电镜下表现为：细胞体积缩小、变圆、活力差，悬浮细胞增多，折光性差。2、5种化疗药物均对3种人结肠低分化腺癌有不同程度的抑制作用，且在一定浓度范围内存在有效抑制浓度，超过此范围，抑制作用进入平台期。3、L-OHP和GEM对3种人结肠癌低分化腺癌抑制作用差异无统计学意义，在体外实验基础上证明该2种化疗药物对结肠低分化腺癌具有广谱性。而5-Fu、CPT-11和DDP的抑制作用差异有统计学意义，证明以上3种化疗药物在作用于相同病理学分期的同一实体肿瘤，其抗增殖作用存在明显差异，该差异即体现了该化疗药物的天然耐药性。4、体外实验证实人结肠癌细胞HCT116对以上5种化疗药物均较敏感，表明相同病理学分期的同一实体肿瘤来自不同的个体，其抑制作用也不尽相同。