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第一部分miRNA-451a及其靶基因在结核病发病过程中的作用[目的]:本研究旨在揭示miRNA-451a在结核病发病过程中发挥的调节作用。通过分析miRNA-451a及其部分靶基因在继发性肺结核、血行播散型结核病患者和健康人中的表达差异,分析其在结核病发生发展过程中的作用。并建立细胞感染模型,进一步验证miRNA-451a的调节作用。同时通过对细胞感染模型的分析,揭示miRNA-451a对巨噬细胞吞噬细菌和杀菌抑菌作用的影响。[方法]:收集符合入组标准的继发性肺结核患者、血行播散型结核病患者和健康人的外周静脉血样本,对所有纳入标本进行RNA提取,并将RNA反转录为cDNA,通过实时荧光定量PCR,对三组样本的miRNA-451a及其靶基因MIF、MMP-9进行相对定量分析,比较其差异。本研究细胞感染模型的构建采用THP-1细胞,设计了 miRNA-451a类似物进行转染,使其表达上调或抑制。后续使用H37Rv标准毒株进行细胞感染实验,对miRNA-451a表达情况不同的细胞组进行菌落形成单位(Colony-Forming Units,CFU)的对比,分析miRNA-451a对巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌以及细胞内细菌存活情况的影响。并通过Western Blot方法对感染后细胞内MIF蛋白的表达水平进行对比分析。[结果]:继发性肺结核组中miRNA-451a及MMP-9的表达水平低于血行播散型结核病组及健康对照组的表达水平,而继发性肺结核组与血行播散型结核病组的MIF表达水平均高于健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.001)。在细胞模型中,miRNA-451 a表达水平升高会负向调控MIF基因的表达水平,同时细胞内MIF蛋白水平亦降低。另外,miRNA-451a表达较高的巨噬细胞吞噬细菌能力显著低于miRNA-451a表达较低的巨噬细胞,并且细胞内细菌存活率高于阴性对照,差异均具有统计学意义(P<0.001)。[结论]:miRNA-451a通过负向调控其靶基因MIF的表达,减弱巨噬细胞抗结核分枝杆菌的活性,使结核分枝杆菌更容易逃脱巨噬细胞的免疫反应,并产生更严重的结核病临床类型。第二部分三种细胞因子在结核性胸水与恶性胸水中的诊断价值[目的]:分析结核性胸水与恶性胸水中巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)、孤核受体α(RORα)和孤核受体γ(RORα)水平的差异,探讨其在肺结核和肺癌鉴别诊断中的价值。[方法]:选取已确诊为肺结核和肺癌的冻存胸水样本各80例,收集研究对象的基本信息,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各样本胸水中的MIF、ROR α及ROR γ水平,应用软件SPSS20.0进行对比分析。[结果]:结核组和肺癌组胸水中的MIF水平中位数(四分位数)[M(Q1～Q3)]分别为 5.83(2.41～16.43)、2.79(0.91～11.12)ng/L,差异有统计学意义(P<0.01);结核组和肺癌组胸水中ROR α水平和ROR γ水平差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]:肺结核患者胸水中MIF水平高于肺癌患者,胸水中MIF水平对结核性胸水和恶性胸水的鉴别有一定诊断价值,ROR α及RORγ的鉴别诊断能力仍有待进一步验证。