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目的:糖尿病足部溃疡（diabetic foot ulcers,DFU）是糖尿病最常见的并发症之一,现有临床治疗方案尚不能有效解决DFU迁延不愈的问题。本研究旨在探讨人脐带间充质干细胞源外泌体（human umbilical cord mesenchymal stem cells derived exosomes,HucMSC-Ex）在DFU模型中的作用及机制,为DFU临床治疗提供新策略。方法:采用高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）构建2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）大鼠模型,并在糖尿病大鼠背部进行皮肤全皮层切除构建快速DFU模型。基于课题组前期建立的外泌体分离提取技术提取HucMSC-Ex和人胚肺成纤维细胞来源外泌体（human fetal lung fibroblasts-1derived exosomes,HFL1-Ex）。将DFU造模成功的大鼠随机分为PBS组、HucMSCEx组、去外泌体上清（exosome-free conditioned medium,Ex-free CM）组、HFL1-Ex组、临床藻酸盐敷料组,在不同时间点观察创面愈合情况、计算并比较创面愈合率、Western blot检测增殖凋亡相关蛋白指标、HE染色观察皮肤结构、免疫组化检测增殖指标PCNA及新生血管指标CD31、天狼星红染色检测胶原分布,从而综合评价HucMSC-Ex对DFU的治疗作用。体外选取大鼠真皮成纤维细胞（dermal fibroblasts,DFL）和人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）为靶细胞。首先用不同浓度葡萄糖刺激靶细胞以构建高糖损伤细胞模型,随后加入HucMSC-Ex干预。通过CCK8实验、细胞克隆形成实验、Transwell迁移实验、小管形成实验观察高糖环境和HucMSC-Ex对细胞活力、增殖、迁移、小管形成能力的影响。根据微小RNA（microRNAs,miRNAs）测序筛选出HucMSC-Ex中可能起到促修复作用的miRNA分子,并用实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,qRT-PCR）对测序结果进行验证。在HEK293T细胞中通过双荧光素酶报告基因实验验证miRNA的下游靶基因。在DFL细胞和HUVEC细胞中通过转染人工合成片段确定miRNA的作用及分子机制。应用电穿孔技术制备工程化HucMSC-Ex,并将工程化HucMSC-Ex应用于体内外模型,探索其是否能成为一种优化治疗方案。结果:HucMSC-Ex对DFU模型的修复作用明显优于其他对照组,同时在体外能逆转高糖对皮肤细胞的损伤。基于miRNAs测序结果,筛选出HucMSC-Ex中富集一种全新的miRNA分子—NC000019.1013474（简称miR-13474）。体内外实验结果证实miR-13474在促进DFU修复中发挥关键作用,并且是通过miR-13474/CPEB2/TWIST1轴完成的。应用电穿孔技术将miR-13474 mimics导入到HucMSC-Ex中,使HucMSC-Ex更加富集miR-13474。体内外实验结果表明过表达miR-13474工程化HucMSC-Ex能更好地治疗DFU。结论:HucMSC-Ex通过介导miR-13474/CPEB2/TWIST1轴促进DFU修复。同时,miR-13474工程化改造的HucMSC-Ex有望成为一种DFU的优化治疗方案。