论文部分内容阅读
目的:对人肺腺癌干细胞进行BASC特征、分化及转移能力分析,并检测癌干细胞3个表型标志(SP-C,CCSP和OCT4)在人肺腺癌组织中表达和分析其与患者预后的相关性。
方法:对人肺腺癌干细胞经流式细胞纯化或无血清悬浮培养获得,所得细胞采用免疫荧光检测BASC特征性标志并经尾静脉注射至免疫缺陷小鼠观察肿瘤转移。采用10%FCS-DMEM培养肺腺癌干细胞观察其分化能力。肺腺癌组织切片采用免疫荧光技术检测癌干细胞的3个表型标志(即SP-C、CCSP和OCT4),Cox多因素回归统计分析评估检测结果与临床病理指标及患者生存的关系。
结果:对人肺腺癌细胞A549、SPC-A1和原代414、CPA-Y2细胞均表达II型肺泡细胞标志SP-C,但少数细胞表达支气管非纤毛柱状细胞标志CCSP和胚胎干细胞基因OCT4,提示此类细胞属于BASC样癌干细胞。采用流式细胞分选技术纯化其中的CD24+CD221+ 肺腺癌干细胞后,发现此类细胞属于CCSP+SP-C+OCT4+细胞,其表型与小鼠BASC相同。此外,肺腺癌细胞在无血清培养条件下经EGF/IGF-1/FGF-10刺激能够形成悬浮生长的球体,这类肺球体细胞的特征也与BASC相同。肺球体细胞在含血清条件下培养2周即发生分化,表现为CCSP和OCT4表达丢失。动物实验揭示肺球体细胞具有高转移能力。在57例肺腺癌中52例检测到癌干细胞,其中40例属于OCT4+BASC(SP-C+CCSP+OCT4+),12例属于OCT4-BASC(SP-C+CCSP+OCT4-)。统计分析显示,癌干细胞表型与肺腺癌的分化相关,OCT4+BASC表型多见于高分化肿瘤而OCT4-BASC表型以低分化肿瘤为主。Cox多因素分析揭示,患者生存分别与病理分期及OCT4+BASC表型相关。
结论:对人肺腺癌干细胞具有BASC特征(SP-C+CCSP+)并表达胚胎干细胞基因OCT4,具有分化及转移能力,在人肺腺癌组织中表达自我更新基因OCT4的癌干细胞(SP-C+CCSP+OCT4+)恶性度高,其患者预后差。提示此类肺癌干细胞可能与小鼠肺腺癌一样,源自肺脏BASC的恶性转化。