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目的:
本实验旨在探讨:1.中药黄芪注射液、血塞通注射液、rhVEGF165载入修饰胶原促实验鸡胚尿囊膜血管生成作用。2.中药黄芪、血塞通注射液联用促实验鸡胚尿囊膜血管生成作用,并探讨其与剂量的关系。3.黄芪注射液、血塞通注射液、rhVEGF165三药联用促实验鸡胚尿囊膜血管生成作用,并探讨其与剂量的关系。
方法:采用体内鸡胚尿囊膜血管模型(ChickEmbryoChorioallantoicMembrane,CAM),将中药黄芪注射液、血塞通注射液、rhVEGF165分别单独或联合载入修饰胶原植入CAM,通过定量测定胶原周围尿囊膜内微血管数,胶原病理免疫组化切片CD34标记血管内皮细胞计数检测上述药物单药及联合用药促血管再生能力。
结果:
1.大体标本观察,修饰后胶原(单独或联合载入黄芪注射液、血塞通注射液、rhVEGF165),血管生成呈“轮辐”状朝向标本生长。
2.单纯胶原组(Hc)与控制组(C)相比微血管计数显著增加(P<0.05);黄芪组(Hc+H)、血塞通组(Hc+X)分别与Hc相比微血管计数显著增加(P<0.05);rhVEGF165(Hc+V)与Hc相比微血管计数及病理免疫组化CD34标记的血管内皮细胞计数均极显著增加(P<0.01);1/2(血塞通+黄芪)[1/2(Hc+X+H)]组和(血塞通+黄芪)(Hc+X+H)组与Ho+X组或Hc+H组相比微血管计数及病理免疫组化CD34标记的血管内皮细胞计数显著增加(P<0.05);Hc+X+H组与1/2(Hc+X+H)组相比微血管计数及病理免疫组化CD34标记的血管内皮细胞计数有增加趋势(P=0.088;P=0.256)。
3.Hc+X+H+V与Hc+X、Hc+H、Hc+V、Hc+H+X组相比微血管计数及病理免疫组化CD34标记的血管内皮细胞计数极显著增加(P<0.01);Hc+X+H+V与Hc+X+V、Hc+H+V组相比微血管计数显著增加(P<0.05),病理免疫组化CD34标记的血管内皮细胞计数极显著增加(P<0.01):1/2(血塞通+黄芪+rhVEGF165)1/2(Hc+X+H+V)组与Hc+H组或Hc+X组相比微血管计数显著增加(P<0.05),病理免疫组化CD34标记的血管内皮细胞计数极显著增加(P<0.01);Hc+X+V、Hc+H+V与Hc+V组相比微血管计数显著增加(P<0.05);Hc+X+V、Hc+H+V与Hc+H+X组相比微血管计数显著增加(P<0.05),病理免疫组化CD34标记的血管内皮细胞计数极显著增加(P<0.01);Hc+X+H+V组与1/2(Hc+X+H+V)相比微血管计数及病理免疫组化CD34标记的血管内皮细胞计数极显著增加(P<0.01)。
结论:
本文通过血塞通、黄芪、rhVEGF165载入修饰后生物膜的鸡胚尿囊膜实验,得出以下结论:
1.修饰后胶原有促血管再生的趋势。
2.中药黄芪注射液、血塞通注射液、rhVEGF165均有显著的促血管生成作用。
3.黄芪注射液、血塞通注射液联用比单用在微血管计数和病理免疫组化CD34标记的血管内皮细胞计数上均有显著差异,故两中药联用促血管生成作用比单药显著,且效果与剂量有相关性。
4.黄芪注射液、血塞通注射液、rhVEGF165,较大剂量三药联用与任一单药和任两药联用在微血管计数上和病理免疫组化CD34标记的血管内皮细胞计数上相比有显著差异,且效果与剂量有相关性,三药联用促血管生成作用效果最佳。