【摘 要】
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ERF转录因子家族是植物中最大的转录因子家族之一,在植物生长发育和逆境胁迫过程中发挥关键的作用。本研究从前期转录组数据中筛选出一个响应盐胁迫的ERF家族基因PsnERF723。本研究以小黑杨为材料,解析PsnERF723基因的生物功能及其应答盐胁迫的调控机制。主要结果如下:（1）克隆小黑杨PsnERF723基因（Potri.010G072300.1）上游序列1384 bp,预测PsnERF723基
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ERF转录因子家族是植物中最大的转录因子家族之一,在植物生长发育和逆境胁迫过程中发挥关键的作用。本研究从前期转录组数据中筛选出一个响应盐胁迫的ERF家族基因PsnERF723。本研究以小黑杨为材料,解析PsnERF723基因的生物功能及其应答盐胁迫的调控机制。主要结果如下:（1）克隆小黑杨PsnERF723基因（Potri.010G072300.1）上游序列1384 bp,预测PsnERF723基因启动子序列中含有与转录、植物生长发育以及植物应答胁迫相关的顺式作用元件。利用酵母单杂交技术鉴定出与PsnERF723基因启动子区域互作的蛋白,包括植物生长发育相关蛋白、防御和运输功能相关蛋白、转录相关蛋白以及氧化还原酶相关蛋白。（2）从小黑杨中克隆PsnERF723基因编码区663 bp的c DNA片段。经生物信息学分析表明PsnERF723基因编码的蛋白质由221个氨基酸残基组成,是包含ERF家族保守结构域的不稳定亲水性蛋白。q RT-PCR分析表明PsnERF723基因受干旱、盐胁迫诱导表达,且具有组织特异性。亚细胞定位结果表明PsnERF723蛋白定位于细胞核中。通过酵母单杂交证明PsnERF723蛋白可与GCC-box元件进行特异性结合。（3）培育转PsnERF723基因小黑杨。在盐胁迫条件下,转PsnERF723基因小黑杨生长状况优于野生型,其SOD活性、POD活性、脯氨酸含量和叶绿素含量均高于野生型,而MDA含量低于野生型;通过NBT、DAB和Evans blue染色显示野生型植株的叶片颜色比转基因植株叶片的着色程度较深。盐胁迫分析表明,转PsnERF723基因小黑杨的耐盐能力优于野生型,说明PsnERF723基因可以调控植物的耐盐性。综上所述,PsnERF723基因可以被盐胁迫诱导表达,并在小黑杨生长发育和响应盐胁迫的反应中发挥关键作用。本研究初步了解PsnERF723基因在耐盐胁迫方面的分子机制,研究结果可为小黑杨抗逆性育种奠定理论基础。
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