蚊杀虫剂表皮抗性的初步研究

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:visualhoxygen
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背景:化学防制一直是蚊媒综合防治的主要方法。杀虫剂长期、大量使用,导致了蚊抗药性。本研究旨在探讨昆虫表皮蛋白(insect cuticle proteins, ICPs)和几丁质合成酶I (chitin synthase I, CHSI)在蚊抗药性中的作用。方法:选择淡色库蚊抗药性蛋白质组与转录组共同鉴定的差异表达表皮蛋白;采用qRT-PCR方法,分别比较淡色库蚊实验室和现场种群的敏感与抗性品系的ICPs和CHSI表达差异;以溴氰菊酯诱导淡色库蚊,对诱导前后ICPs和CHSI的差异表达进行了定量检测;克隆主效基因Unigene3941_All全长序列,并进行同源性比对与进化树分析;采用基因微注射方法验证主效基因Unigene3941_All的功能。结果:淡色库蚊实验室和现场种群敏感与抗性品系的14个表皮蛋白和几丁质合成酶Ⅰ存在差异表达;Unigene3941_All基因表达量的变化远大于其它13个表皮蛋白:Jnigene3941_All基因在敏感品系的表达占10.78%,而在抗性品系的表达则上升到73.95%;另13个表皮蛋白在敏感品系的表达占89.22%,而在抗性品系的表达则下降到26.05%;基因注射敲低Unigene3941_All基因的表达水平后,另13个表皮蛋白的表达量升高,结果蚊溴氰菊酯抗性下降,致死率增加;经溴氰菊酯诱导,表皮蛋白和几丁质合成酶Ⅰ的mRNA表达量均在诱导恢复12或24h后达到最高峰,随后表达量急剧下降;克隆获得Unigene3941_All基因全长序列为732bp, ORF区域长度为390bp,共编码129个氨基酸(GenBank/KF723314,2013).结论:表皮蛋白和几丁质合成酶Ⅰ均与蚊杀虫剂抗性相关,可能共同形成了蚊杀虫剂表皮抗性;Unigene3941_All基因可能在抗药性中发挥主效作用;表皮蛋白家族参与杀虫剂抗性,可能存在某种内部调节机制。
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