母鼠孕期感染流感病毒对子代情绪及行为的影响

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目的:  孕期感染可导致子代脑部发育异常,这些异常涉及神经内分泌系统,神经元的代谢、脑部神经营养物质的表达、信号传递等;从而使子代出现意识丧失、学习认知下降、行动行为改变、情绪障碍等异常。而流感病毒引起的孕期感染,具体会引起子代哪些异常行为;同时孕期感染流感是否会恶化子代在面对后天应激时,在情绪和行为方面的异常,均不明确。本研究探讨甲型流感病毒A/PR/8(PR8)引起的孕期感染,对子代青春期的情绪行为、大脑内炎症因子、神经营养因子和神经递质的影响;继而用慢性不可预见性应激联合孤养,观察孕期感染是否会使感染组子代面对应激时,在其行为和大脑内神经递质存在更为严重的影响。这将为流感引起的孕期感染对子代情绪及行为的影响提供必要的实验依据。  方法:  ⑴构建孕期感染流感病毒小鼠模型:将10周龄的BALB/c雌鼠与雄鼠交配,观察到阴道栓的雌鼠被确认为怀孕第0.5天。在怀孕第7-9天,用流感病毒PR8或生理盐水滴鼻。⑵孕期滴鼻PR8的子代设为实验组(FLU组),孕期滴鼻生理盐的子代小鼠设为对照组(CON组),随机选取5周龄子代小鼠,利用实时定量PCR检测大脑皮层和海马内肿瘤坏死因子α(TNFα)、白介素6(IL-6)和脑源性神经营养因子(BDNF)的mRNA表达水平。利用Elisa检测大脑内五羟色胺(5-HT)及去甲肾上腺素(NE)含量。⑶对另一部分发育至5周龄的子代小鼠进行行为学测试,包括糖水偏好实验、旷场实验、高架十字迷宫、Y字迷宫和强迫游泳。行为学测试后,对子代小鼠进行为期4周的慢性不可预见性应激联合孤养,模拟子代成年后面对的环境压力,对应激后子代小鼠进行第二轮行为学测试。最后用Elisa检测大脑内5-HT及NE的含量。⑷统计学方法根据数据类型,选择独立样本t检验或独立样本非参数检验。  结果:  ①青春期子代小鼠,糖水偏好实验显示实验组摄取糖水百分比显著少于对照组。旷场实验显示在总活动路程和总活动时间无差异的情况下,实验组在中央活动路程和时间上,均显著长于对照组。高架十字迷宫显示实验组与对照组在总入臂次数无差异的情况下,实验组进入开放臂的次数更多,在开放臂滞留时间更长,在开放臂路程也更长。Y字迷宫和强迫游泳显示实验组和对照组之间均无差异。大脑皮层内TNFα、IL-6和BDNF的mRNA表达下调,海马内TNFα和BDNF的mRNA表达上调。大脑内5-HT和NE含量与对照组相比,并无差异。②慢性不可预见性应激联合孤养后,实验组与对照组在情绪,行为和大脑内5-HT和NE含量上均无差异。  结论:  ⑴孕期感染流感病毒PR8,其子代小鼠在青春期,伴有躁狂和抑郁两种情绪,且以躁狂情绪为主;空间记忆能力上与对照组相比,并无差异;大脑皮层处于抑炎状态,海马处于炎症状态;以上异常与大脑内5-HT和NE的含量无关联。⑵孕期感染流感病毒PR8,其子代小鼠在成年后,经过4周慢性不可预见性应激联合孤养,在情绪、行为、空间记忆能力及大脑内5-HT和NE的含量上与对照组相比,均无差异。即面对后天应激时,孕期感染流感病毒PR8并不会对子代的情绪、行为和大脑内5-HT和NE水平造成更严重的影响。
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