灭幽汤治疗幽门螺杆菌相关性胃炎脾胃湿热证模型鼠的机理研究

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目的:观察幽门螺杆菌相关性胃炎(HAG)脾胃湿热证小鼠模型TLR4、IL-6及TNF-α的表达,通过分析上述因子的表达,探讨清热祛湿的灭幽汤治疗HAG脾胃湿热证可能的作用机理。方法:1.将BABL/c小鼠分成空白组、单纯湿热组、单纯Hp组、模型组、灭幽汤组、胃三联组(丽珠得乐、替硝唑、克拉霉素)。空白组常规饲养;单纯湿热组:置于湿热环境中以高糖高脂饲料饲养;单纯Hp组:常规饲养并给予幽门螺杆菌感染;模型组:使用复合因素(湿热环境、高糖高脂饲料、幽门螺杆菌感染)造成HAG脾胃湿热证小鼠模型;灭幽汤组:使用复合因素造成HAG脾胃湿热证小鼠模型并给予灭幽汤治疗;胃三联组:使用复合因素造成HAG脾胃湿热证小鼠模型并给予胃三联药治疗。用药方法和给药时间为连续灌胃2周。2.采用HE染色法观察各组小鼠胃粘膜组织病理改变。3.采用Elisa法检测小鼠血清IL-6、TNF-α的表达情况。4.采用免疫组化法观察小鼠胃黏膜组织TLR4蛋白的表达情况。5.采用qRT-PCR法检测小鼠胃粘膜组织TLR-4mRNA的表达情况。结果:模型组、单纯湿热组、单纯Hp组小鼠胃组织的TLR4蛋白、mRNA及血清IL-6、TNF-α表达增加较空白组均有统计学意义;模型组表达增加与单纯湿热组,单纯Hp组比较小鼠胃组织的TLR4蛋白、mRNA及血清IL-6、TNF-α表达差异均有统计学意义。服用灭幽汤的模型鼠的一般生理状况显著改善。治疗组小鼠胃组织中TLR4蛋白、mRNA及血清IL-6、TNF-α表达方面,各治疗组与模型组相比均有显著统计学意义(P<0.01),灭幽汤组与胃三联组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:灭幽汤对小鼠一般生理状况的改善优于胃三联;灭幽汤能有效降低HAG脾胃湿热证小鼠胃黏膜炎症反应,其机理可能是通过根除Hp,降低TLR4的表达程度,减少IL.6、TNF-α的表达,同时促进组织的修复,从而发挥其治疗作用。
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