目的:该室和其他人已经报道在脑缺血过程中,CaMKⅡ的活性是下降的,但下降的原因尚不清楚。最近有研究报道CaMKⅡ可以发生S-亚硝基化,并且这种亚硝基化作用导致CaMKⅡ活性下降。本文主要研究,在脑缺血过程中,CaMKⅡ活性下降是否与它的亚硝基化有关。　　 方法:采用四动脉结扎法构建大鼠全脑缺血模型。分别给予Sprague-Dawley大鼠腹腔注射MK801(3mg/kg)、7-硝基吲唑(70-NI,25mg/kg)、脑室注射GSNO(100ug/kg)、二硫苏糖醇(DTT,100nM)。主要运用SDS-PAGE、免疫印迹和免疫组织化学方法对蛋白质的磷酸化作用进行研究;应用焦油紫染色方法检测脑缺血诱导的海马神经元的存活和死亡;蛋白质的S-亚硝基化的检测主要是通过‘生物素转化法’(Biotin-Swich method)。　　 结果:脑缺血能促进CaMKⅡ的S-亚硝基化,给予7-NI(Nnos的抑制剂)、MK801(NMDA受体的拮抗剂)或GSNO(外源性NO供体)均能够降低脑缺血诱导的增加的CaMKⅡ的S-亚硝基化,同时增加CaMKⅡ的磷酸化水平。然而,给予DTT能拮抗GSNO的作用。另外,结果显示脑缺血能够降低Nnos的S-亚硝基化和磷酸化水平。给予7-N1、MK801或GSNO,观察到可以增强脑缺血过程中nNOS的S-亚硝基化和磷酸化水平。通过焦油紫染色能直观的看到以上药物对脑缺血海马组织的保护作用。　　 结论:　　 1)首次证明大鼠全脑缺血能诱导CaMKⅡ发生S-亚硝基化。　　 2)脑缺血可以使nNOS去亚硝基化,从而激活nNOS的活性。　　 3)NMDA受体的拮抗剂,外源性NO供体及nNOS的抑制剂均能够通过抑制nNOS活性,从而抑制CaMKⅡ的S-亚硝基化。　　 结果提示,在脑缺血过程中, CaMKⅡ活性下降是由它的S-亚硝基化引起的;nNOS活性能够影响CaMKⅡ的活性,进而说明了Nnos和CaMKⅡ之间存在偶联关系。NMDA受体的拮抗剂,外源性NO供体及nNOS的抑制剂在这一过程中具有神经保护作用。这一发现可能为脑卒中的治疗提供新思路。