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香蕉(Musa spp.)是世界四大水果之一,同时也是重要的粮食作物,具有重大的经济价值,但常常遭遇低温等伤害,造成了不可估量的损失。因此加快培育出抗寒新品种成为了亟需解决的问题。而福建省具有丰富的优良抗性的野生蕉资源,可以为香蕉育种提供宝贵的种质资源和基因资源。因此急需开展对野生蕉离体繁殖和遗传背景的研究,进一步挖掘和利用野生蕉优良的抗性基因,完善香蕉抗寒性研究理论,为培育和改良香蕉新品种提供新的途径和奠定理论基础。本研究以福州晋安区的若干野生蕉为材料,在实验室前期研究的基础上,主要进行了日溪野生蕉遗传多样性的ISSR分析,宦溪野生蕉离体保存条件的研究,宦溪野生蕉APX家族基因的克隆、定量表达分析以及转化烟草等研究。主要结果如下:1福州日溪野生蕉自然群体遗传结构的ISSR分析本试验以福州市日溪乡自然居群的38份野生蕉样品为材料,采用ISSR分子标记并结合相关软件进行遗传结构分析。试验结果表明:筛选的13条引物共扩增得到116条DNA条带,多态性条带为70条,多态性条带百分率为60.34%,表明福州日溪野生蕉自然群体具有较高水平的遗传多样性;结合NTSYS和STRUCTURE聚类分析将38份野生蕉样品划分为6大类,结合Q值分析表明,福州日溪野生蕉群体内部存在着一定的遗传信息交流。2光质对福州宦溪野生蕉离体繁殖的影响以实验室继代保存的宦溪野生蕉组培苗为材料,研究不同光质(红光、蓝光、绿光、紫光、白光、黄光)对宦溪野生蕉组培苗的离体繁殖的影响。结果表明:1.白光条件下宦溪野生蕉增殖效果最好,红光下更有利于野生蕉的离体保存,其他光质培养下的组培苗形态会产生非正常变化。2.不同光质下叶绿素含量的测定白光处理下叶绿素含量最高。3.不同光质条件下测定的POD酶活性大小依次为:红光>紫光>绿光>黄光>蓝光>白光;而CAT酶活性大小则为:白光>黄光>紫光>蓝光>绿光>红光。3福州宦溪野生蕉APX家族基因克隆及生物信息学分析从宦溪野生蕉中分离得到APX家族基因7个成员的cDNA完整序列。其全长序列长度为1031 bp-1473 bp,编码氨基酸数目为249-426个。生物信息学分析表明:APX家族基因7个成员均是无信号肽的非分泌亲水蛋白,APX1-1、APX1-2和APX1-3蛋白稳定,其他四个不稳定;亚细胞定位预测表明:APX1-1、APX1-2、APX1-3定位于过氧化物酶体;APXS-1定位于线粒体基质空间;APXT-1定位于线粒体内膜和细胞质膜;APX4-1定位于内质网;APX4-2定位于细胞质膜;APX家族基因7个成员均具有KatG,PRK15061的保守结构域,属于plant_peroxidase_like超家族,其中APX1-2还属于ApbE superfamily超家族。APX1-2、APX1-3和APXS-1不存在跨膜结构,其他成员多具有由内向外的跨膜结构,磷酸化修饰以丝氨酸为主,苏氨酸和酪氨酸含量较少。二级结构由α螺旋、p转角、无规则卷曲以及伸展构象组成,其中以α螺旋和无规则卷曲为主,伸展构象次之,β转角所占比例最少。APX家族基因7个成员均有卷曲螺旋结构,三维结构近似球型。序列比对和系统进化分析表明:APX家族7个基因成员同源性较低,亲缘关系较远,预测APX家族基因成员的功能不同或具有协同作用。4福州宦溪野生蕉APX家族基因在不同温度下定量表达分析试验对宦溪野生蕉组培苗在不同温度下下的表达模式进行分析,结果表明:APX家族基因7个成员在不同温度下均有表达且表达模式不尽相同。APX1-1、APX1-3和APX4-2表达量变化呈“倒U型”;APXS-1和APXT-1在13℃处理下表达量达到极值,呈现“降-升-降-升”的模式;APX4-1呈现“先降后升”的模式;APX1-2则呈现“U型”表达模式,在28℃和0℃下均大量表达。5.福州宦溪野生蕉MuAPX1-2转化烟草研究本试验采用酶切连接法成功构建了MuAPX1-2基因的正义和反义-pCAMBIA 1301-(±)-Mu-APX1-2表达载体,成功转化到农杆菌EHA105感受态细胞中。采用农杆菌介导法转化烟草,对转基因烟草植株进行PCR检测和GUS检测,最终获得正义转化烟草17株,反义转化烟草20株,转基因植株阳性率为69.81%。目前已经获得了正义和反义TO代转基因烟草种子。