正常情况下，人从外界获得信息的75％-87％来自视觉，90％的行为是对视觉信息的反馈。人的眼睛是一个高度精密的光学系统。许多具有特殊功能的眼组织共同组成了这个系统。其中，视网膜具有实现感光并且将光信号转换为电信号，再传输给神经网络等作用。现代医学表明，视网膜中的视网膜色素上皮层是眼底吸收光线最多的一层，其细胞内新陈代谢正常与否也成为是否导致眼底疾病产生的关键，人量的眼科学研究都把目标集中在视网膜色素上皮层与各种眼底致盲疾病，例如老年性黄斑变性、糖尿病视网膜疾病、视网膜炎等的关系上。但目前在临床上普遍使用的眼底成像装置，在高空间分辨、多功能信息提取的要求下，越来越显示出其不足。因此，寻找一种能准确提供眼底细节，尤其是功能信息的全新的成像方法，用以实现眼底疾病的早期诊断成为现代眼科医学及临床亟待解决的问题。 利用一种基于时间相关单光子计数器的双光子激发自体荧光寿命显微成像技术，对猪眼底视网膜色素上皮层细胞内的脂褐素和氧化黑色素颗粒的空间分布及其荧光寿命特性进行了研究，尤其对于这些色素颗粒在光致氧化环境中的荧光寿命差异进行了比较，实现了视网膜色素上皮层在亚细胞水平的分析研究。本论文从RPE细胞双光子激发白体荧光强度图像分析入手，通过对RPE细胞形态及细胞内不同位置白体荧光寿命特征的对比研究，逐步证实在RPE细胞中主要存在两种不同寿命值的荧光团成分：位于细胞质中的长寿命成分为绑定蛋白的FAD，其寿命分布峰值大约1.4ns；短寿命成分主要位于细胞核及靠近细胞膜的部位，寿命在500ps～650ps之间，其成分为脂褐素。结果表明，利用荧光寿命测量能有效区分视网膜色素上皮层细胞中的多组分荧光团，利用荧光寿命的衰减参数可分辨正常及异常的荧光现象，并且揭示了视网膜色素上皮层细胞中内源荧光团在细胞内的分布规律和荧光团成分，为探索RPE细胞新陈代谢状态及衰老因素提供了参考依据。该方法有望发展成为一种用于眼科临床诊断及病理学研究的高灵敏度的工具，对眼底细胞随年龄增长的衰老机制的研究具有重要的意义。