茶叶是数千年来上世界最受欢迎的饮料之一,中国是茶叶生产和消费大国。茶叶中含有多种有益人体健康的成分,如多酚类物质、氨基酸、生物碱等,正是这些有效生化成分通过多种途径发挥着多种有益作用,如抗氧化、抗突变、抗癌和抗过敏等。因此,针对茶叶中的有效生化成分建立快速、高效、准确的定性定量检测方法成为研究热点。近年来,产于中国广东省潮安县凤凰镇的凤凰乌龙茶,因为其香气类似天然花香并具有特殊韵味,引起国内众多学者的兴趣。目前针对凤凰乌龙茶的研究主要集中于其香气形成原因、抗氧化作用和生产管理方面,对其主要有效生化成分进行系统全面的检测分析还未见报道。因此,本实验建立了对茶叶中10种儿茶素单体、没食子酸、可可碱、咖啡碱和茶碱在15mmin内的高效液相色谱(HPLC)检测法,以及同时对茶叶中17种游离氨基酸的HPLC检测法；并将建立的方法应用于凤凰乌龙茶的检测分析。主要研究结果如下：1.通过实验室已有的儿茶素标品和甲基化儿茶素高含量茶——日本Benifuji茶,采用大孔树脂HP-20对Benifuji绿茶茶样富集得到粗茶多酚后,运用中压层析系统,80%乙醇洗脱Toyopearl HW-40S柱,对不同组分分别收集再次以同样的条件分离纯化后,得到了纯度分别为98.4%和95.3%的甲基化儿茶素EGCG3"Me和ECG3’Me(所得甲基化儿茶素的结构经1H NMR、ESI-TOF-MS分析,被证明分别与文献报道的EGCG3"Me和ECG3’Me的1H-NMR数据一致),以及纯度>97%的儿茶素单体EC、EGC、ECG和EGCG。2.将得到的较高浓度儿茶素单体EC、EGC、EGCG和ECG,加热异构化后由半制备色谱柱Zorbax SB-C18,采用AKTA purifier分离得到纯度均>98%儿茶素单体C、GC、GCG和CG。所得单体结构也均经过1H-NMR、ESI-TOF-MS分析证明。3.采用OPA(邻苯二甲醛)柱前衍生化HPLC检测,建立了17种游离氨基酸检测的定性和定量方法；采用SPE(固相萃取)柱处理茶汤,吸附了茶汤中大部分多酚类物质,从而去除了其对氨基酸检测时的影响,并设计实验证明了SPE处理法的可行性和有效性。4.通过已经建立的HPLC法对11种凤凰乌龙茶中10种儿茶素、咖啡碱、可可碱、茶碱和没食子酸进行定量分析。发现凤凰乌龙茶中没食子酸、可可碱和茶碱的含量较低；咖啡碱含量比较高,与凤凰茶的生长环境有关；所有凤凰乌龙茶中的酯型儿茶素含量都很高,从侧面说明了凤凰乌龙茶的优秀品质形成条件；采用SPE处理,OPA柱前衍生化对11种凤凰乌龙茶中的17种游离氨基酸进行了定量分析。发现虽然11种茶样的氨基酸总量都比较低,所含种类和含量有较大差异,但天冬氨酸Asp、谷氨酸Glu、丝氨酸Ser和茶氨酸Thea仍为所有茶样中的主要氨基酸。