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衰老是所有生物体不可避免的进程,同时也是导致大部分神经退行性疾病发生的主要原因。氧化应激与衰老密切相关,而且在引起衰老相关神经退行性疾病的神经元细胞死亡和神经突生长受损过程中起到重要作用。乌龙茶属半发酵茶,由于其鲜叶原料和加工的独特性,使其生理活性成分独特,特别是儿茶素二聚体oolonghomobisflavan A(OFA)和oolonghomobisflavan B(OFB)。本论文以清香型铁观音乌龙茶(QFT)、浓香型铁观音乌龙茶(NFT)和陈香型铁观音乌龙茶(CFT)为试验材料,应用体外培养神经细胞(Neuro-2a和HT22)和体内秀丽隐杆线虫为模型研究三种不同乌龙茶提取物(OTEs)及儿茶素二聚体(OFs)抗衰老及衰老相关神经退行性疾病的作用与机制。主要研究结果如下:(1)利用广泛靶向代谢组学技术,对OTEs(QFT、NFT和CFT)所有的代谢物进行检测,共检测到664个代谢物,黄酮类化合物占主导地位,其次是酚酸、氨基酸及其衍生物、脂质、有机酸、核苷酸及其衍生物、生物碱、鞣质、木脂素和香豆素类化合物、萜类化合物。同时筛选到QFT vs NFT、QFT vs CFT和NFT vs CFT比较组的差异代谢物数量分别为132个(72个上调、60个下调)、255个(118个上调、137个下调)、163个(80个上调、83个下调)。(2)利用野生型秀丽隐杆线虫N2和多种转基因(突变体)线虫为模型,探讨OTEs和OFs对线虫平均寿命的影响及其作用机制。结果表明,OTEs不能延长野生型秀丽隐杆线虫N2在正常培养条件下的平均寿命,但可以提高线虫抵抗慢性(高葡萄糖诱导的N2、突变体线虫TK22)和急性(80μM胡桃醌)氧化应激能力,并在氧化应激条件下通过DAF-16信号通路显著提高线虫存活率和延长寿命。OFs在正常培养和急性氧化应激条件下都能通过DAF-16信号通路显著提高线虫存活率和延长平均寿命。另外,OTEs和OFs对线虫存活率或平均寿命的作用与SKN-1信号通路无关。(3)利用体外培养神经细胞(Neuro-2a和HT22)为模型,采用MTT、LDH、q RT-PCR、细胞形态学等方法检测OTEs和OFs对谷氨酸诱导的神经细胞毒性的保护作用。结果表明,OTEs和OFs均能通过上调GSTo1、GSTa2、GPx、SOD1、SOD2等神经元抗氧化酶m RNA表达,降低神经元内ROS水平,从而提高对谷氨酸诱导的神经细胞毒性的保护作用,减少神经细胞死亡。(4)利用Neuro-2a神经细胞为模型,在低浓度胎牛血清(1%FBS)培养条件下,采用q RT-PCR和细胞形态学方法检测OTEs和OFs对细胞神经突生长的影响。结果表明,OTEs和OFs通过上调跨膜蛋白Ten-4表达促进神经突生长,并且这一结果进一步通过检测神经突生物标记物GAP-43表达量上调得到验证。(5)利用转基因线虫神经退行性疾病模型,探讨OTEs和OFs的神经保护作用。结果表明,OTEs和OFs除了能延缓Aβ1-42诱导的转基因线虫CL4176毒性产生的瘫痪作用,提高Aβ1-42诱导的趋化缺陷转基因线虫CL2355的趋化能力,还可以抑制α-synuclein在转基因线虫NL5901上的聚集。初步在秀丽隐杆线虫模型上证明OTEs和OFs具有抗衰老相关神经退行性疾病的作用。(6)虽然QFT、NFT和CFT三种不同的铁观音乌龙茶经广泛靶向代谢组学技术检测后的代谢物含量之间存在一些差异,本研究实验结果表明,这三种乌龙茶对抗衰老及衰老相关神经退行性疾病的作用效果没有显著性差异,说明它们具有的抗衰老及衰老相关神经退行性疾病作用很可能是由于乌龙茶特异(半发酵)的工艺引起,而与不同品类铁观音乌龙茶的加工方式无关。该问题有待进一步的研究。综上所述,本研究首次将OTEs和OFs应用在神经细胞(Neuro-2a和HT22)和秀丽隐杆线虫模型上,并发现OTEs和OFs具有延缓衰老及衰老相关神经退行性疾病的作用,该发现对于进一步完善乌龙茶的保健功效,扩大乌龙茶的消费量具有重要的意义,同时也为天然产物OFs作为抗衰老和衰老相关神经退行性疾病的潜在候选药物提供了一定的理论基础。