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本论文建立了呋喃它酮代谢物AMOZ的胶体金免疫层析试纸条和免疫亲和凝胶柱分析方法,并用于动物源性食品中呋喃它酮代谢物残留的可视化快速检测。呋喃它酮代谢物AMOZ特异性抗血清(免疫原为CPAMOZ-BSA)采用Protein A-Sepharose4B免疫亲合层析法纯化,得到呋喃它酮代谢物AMOZ的特异性多克隆抗体,戊二醛法合成包被抗原(AMOZ-OVA)。柠檬酸三钠还原法制备17、20、25nm的胶体金粒子,经优化选择17nm的胶体金标记抗体。并优化胶体金免疫层析试纸条的层析条件,抗原、羊抗兔二抗、金标抗体分别稀释5、65、10倍稀释,硝酸纤维素膜选用型号是Millipore135s,抗原稀释液为磷酸盐缓冲溶液(pH7.4),包被条件是37℃30min。以最优层析条件组装呋喃它酮代谢物胶体金免疫层析试纸条,建立呋喃它酮代谢物免疫层析试纸条分析方法,对NPAMOZ标准品的检出限为3μg/L。该分析方法具有很好的特异性,除对呋喃它酮原药有交叉反应外,与其他硝基呋喃类药物及其代谢物及其他8种常用兽药均无交叉。选取牛肉、鲷鱼、鸡肉、虾肉、猪肉、鱿鱼、鸡肝、黄花鱼作为检测样品,添加AMOZ标准品,用快速衍生化方法(60℃水浴下衍生反应120min)转化成NPAMOZ,对样品进行处理后用所建立的胶体金免疫层析试纸条方法检测,对样品中AMOZ的检出限为0.5μg/kg。活化酯法制备酶标抗原(CPAMOZ-HRP),用溴化氢活化的琼脂糖凝胶与呋喃它酮代谢物抗体和HRP多克隆抗体偶联,分别制得抗体胶和HRP抗体胶。把溴化氢活化的琼脂糖凝胶封闭处理后制成封闭胶。并对免疫亲和凝胶检测柱工作条件进行了优化,抗体胶、酶标抗原、HRP抗体胶的稀释倍数分别为80、150000、20倍,工作液pH7.4,加样时间是1min,显色时间为.3~4min。以最优的工作条件建立呋喃它酮代谢物免疫亲和凝胶检测柱分析方法,本方法对NPAMOZ标准品的检出限为20μg/L。建立的免疫亲和凝胶检测柱分析方法具有很好的特异性,除对呋喃它酮原药有交叉反应外,与其他硝基呋喃类药物及其代谢物均没有交叉。选取8种动物源性产品作为检测样品,添加AMOZ标准品,运用快速衍生方法对样品进行处理后应用所建立的免疫亲和凝胶检测柱方法检测,对样品中AMOZ的检出限为3μg/kg。本实验建立了两种快速可视化检测呋喃它酮代谢物的分析方法,与酶联免疫分析方法的一致性较好,验证了方法的准确性。并且检测步骤简单,目测即可得出结果,无需借助仪器,整个检测时间不超过10min,适用于大量样品的快速筛选,具有很好的发展前景。