作为程序性坏死的末端效应分子，MLKL是我们实验室发现的一类优先通透镁离子的新型阳离子通道。MLKL参与多种疾病过程，比如肿瘤、炎症、以及多种神经系统疾病，至今尚无明确的靶向MLKL通道的抑制剂。本论文成功构建了用于MLKL通道小分子抑制剂筛选的三种方法。　　首先，我们构建了基于囊泡的筛选方法。我们采用磷脂酰胆碱与胆固醇2∶1的囊泡稳定包裹CoroNa染料，系统优化条件发现10μM CoroNa、600 mM Na+、18μg的MLKL氨基端蛋白能够产生最大的检测窗口。然后，我们构建了基于细胞死亡模型的筛选路线。分别采用肿瘤坏死因子/胱天蛋白酶抑制剂诱导L929细胞发生程序性坏死以及瞬时转染人MLKL氨基端质粒诱导HEK293细胞发生程序性坏死，考察了458个化合物对坏死的影响，发现了针对这两种细胞死亡模型同时具有保护作用的化合物66＃和200＃。最后，我们建立了基于平面脂双层电生理系统的筛选手段，验证了鸡源、马源、鼠源MLKL氨基端蛋白和人源MLKL氨基端突变蛋白都具有离子通道的活性，检验了化合物66＃和200＃对人源MLKL通道孔区的作用。　　敲除MLKL基因对胚胎发育和个体成长并无影响，而抑制程序性坏死通路的RIP1和RIP3会产生严重的副作用，因此MLKL通道可作为治疗程序性坏死相关疾病的潜在靶标。目前尚无靶向MLKL通道小分子抑制剂，该项研究不仅为MLKL小分子抑制剂的发现提供有力的方法学，极大推动与程序性坏死相关疾病的研究，使MLKL通道为靶点的药物研发成为可能，而且为进一步研究程序性坏死的机制提供有利手段和模型。