论文部分内容阅读
目的：探讨在乳腺癌形成过程中，SDF-1／CXCR4生物学轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡过程的影响，试图去揭示肿瘤形成的一种新的分子机制。 方法：我们以乳腺癌MCF-7细胞系为研究对象。采用SDF-1／CXCR4生物学轴阻断性抗体抗人CXCR4 mAb为干预手段，通过Western Blot、MTT比色法、软琼脂克隆形成实验、流式细胞仪、Hochest／PI活细胞吸收分析法、DNA电泳等方法观察MCF-7细胞增殖、凋亡能力的改变。 结果：1、通过Western Blot免疫印迹法检测乳腺癌细胞MCF-7表达CXCR4蛋白，并且该蛋白为膜蛋白。2、采用MTT比色法、软琼脂克隆形成实验以及流式细胞仪定性定量检测PCNA蛋白，证明MCF-7细胞经CXCR4 mAb作用后增殖能力与同步对照组相比较明显降低（P＜0.05，n=5），PCNA表达水平下调，含量为（78.1±3.6）％（n=3），而对照组为（91.6±5.3）％（P＜0.05，n=3）。3、DNA电泳显示清晰的DNAladder；Hochest／PI活细胞吸收分析法检测CXCR4mAb组的凋亡细胞为17.8％；通过流式细胞仪检测细胞周期证明MCF-7细胞在CXCR4mAb作用下复制停滞于G2／M期，并且出现明显的“亚二倍体”凋亡峰。以Western Blot免疫印迹法检测CXCR4 mAb作用下MCF-7细胞caspase-3蛋白强表达。 结论：CXCR4蛋白属于非分泌型蛋白。CXCR4 mAb可抑制肿瘤细胞的增殖能力，促进凋亡。SDF-1／CXCR4生物学轴可能以抑制细胞凋亡的形式参与了肿瘤的形成过程，而caspase-3蛋白可能是其中一条重要的信号转导途径。表明SDF-1／CXCR4生物学轴可通过介导乳腺癌细胞间的“对话”进而调控肿瘤细胞的增殖、凋亡，这些结果为临床治疗肿瘤提供了新的思路和方法。