离体人肺癌穿刺后溢出癌细胞接种裸鼠种植转移的研究

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目的:通过研究证明肺肿瘤穿刺后,穿刺针尖洗脱液、穿刺针芯组织条洗脱液以及脏层胸膜针孔洗脱液中有癌细胞存在,将其接种于裸鼠皮下可以使裸鼠成瘤,并得出具体的成瘤概率,同时验证所用裸鼠是否对新鲜人肺癌组织敏感,是否是本实验合格实验动物。目的用以指导临床医生在评估是否行穿刺确诊时能做出更适当的选择,为广大患者朋友谋取更多福音。【方法】:(1)取40例手术台上行剖胸肺叶切除术刚切下的新鲜完整的人肺叶,肺叶均来自湖南省肿瘤医院胸外一科未行放疗及化疗治疗的患者,并且已在湖南省肿瘤医院病理科行术中快速冰冻切片确诊为癌;(2)饲养40只先天无胸腺的免疫缺陷裸小鼠,品系为BALB/CA-NU,均为4-8周龄,体重18-22g,雌雄各半。饲养在湖南省肿瘤医院动物实验中心的SPF级无菌饲养室内;(3)使用TSK半自动型活检针在上述前30例新鲜完整人肺叶的瘤体部位模拟穿刺5次,使用少量生理盐水反复冲洗瘤体脏层胸膜穿刺孔、穿刺针针尖以及穿刺针芯中的组织条,收集洗脱液三管并浓缩提纯处理成0.2ml接种液;(4)切开剩下10例新鲜完整人肺叶上的瘤体,取绿豆大小瘤体组织;(5)40只裸鼠分两批,第一批30只,在其皮下3个部位分别接种脏层胸膜穿刺针孔、针尖及针芯接种液。接种后用生理盐水震荡离心管,震荡后将冲洗液涂片镜检找癌细胞。第二批10只,在其皮下包埋上述绿豆大小瘤体组织。(6)所有裸鼠处理完后均继续饲养30天然后处死,取接种点及包埋点皮下组织行石蜡切片查看是否成瘤,且所成瘤体的类型及分化程度是否与对应患者的常规病检结果相一致,由此得出成瘤率。【结果】:(1)接种洗脱液的30只裸鼠皮下各接种点中,针尖接种点皮下未见成瘤,成瘤率0%,针芯组织条洗脱液接种点皮下也未见成瘤,成瘤率0%;(2)脏层胸膜针孔洗脱液接种点皮下可见1例成瘤,成瘤率为3.3%,所成瘤为腺癌,成瘤类型与分化程度于来源患者一致;(3)离心管冲洗液涂片镜检看到癌细胞;(4)包埋瘤体组织的10只裸鼠中7只皮下可见成瘤,成瘤率70%,所成瘤均为腺癌,成瘤类型与分化程度与来源患者一致。【结论】:(1)本实验证明肺穿刺后,穿刺针尖洗脱液、针芯组织条洗脱液以及脏层胸膜针孔洗脱液中有癌细胞存在,故肺穿刺后有发生种植转移的风险;(2)本实验证明肺穿刺后脏层胸膜针孔洗脱液接种于裸鼠皮下有很低的成瘤率(3.3%);(3)尚不能完全证明针尖洗脱液及针芯组织条洗脱液接种于裸鼠皮下不能使其成瘤;(4)本试验所使用的BALB/CA-NU品系裸小鼠对新鲜人肺癌组织敏感,是本实验的合格实验动物;(5)提示在肺穿刺后所发生的胸膜腔及针道种植转移的事件中,不同类型的癌发生种植转移的几率或许不同,腺癌或许比鳞癌更易发生种植转移。
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