具有EGCG缓释能力的壳聚糖复合骨组织工程支架的研制

来源 :华东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ganjinwei2001
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骨组织工程成为修复骨损伤的一种具有前景的技术手段,而制备具有促进骨再生能力的支架是骨组织工程支架应用的关键。骨组织工程支架促进骨再生的能力依赖于材料中的生物活性分子发挥功能性作用。其中,作为植物源性天然化合物的表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)具有成骨诱导功能,又因其具有来源广泛、无毒副作用的优点,而可以应用于骨组织工程。但EGCG易被细胞代谢或培养基中不稳定而失去生物活性。为此,本文为提升EGCG的生物利用度,采用壳聚糖(CS)为基础材料,结合羧甲基纤维素钠(CMC)和蒙脱土(MMT),制备EGCG的缓释支架,并评价了所构建的骨组织工程支架用于人脐带间充质干细胞(HUMSCs)体外增殖与向成骨细胞分化时的效果。本文首先确定了 EGCG发挥促进HUMSCs增殖与向成骨细胞分化作用的最适浓度范围为2.5-5.0 μM。在此浓度基础上制备了包载EGCG的壳聚糖微球(ECM),并利用FT-IR与XRD分析证明了 EGCG的成功包载。ECM微球的EGCG包封率为(40.47±1.20)%,且EGCG可持续释放7 d。但ECM微球的粒径较小不利于细胞的贴附,无法支持细胞的生长。进一步,将ECM与CS、CMC及MMT充分混合,并采用冷冻干燥法制备了包裹ECM的壳聚糖复合支架CS/CMC/MMT-ECM。FT-IR和XRD分析结果显示所制备支架为上述四种物质的混合物。SEM分析结果表明了该支架具有互通的多孔结构。对该支架的物化性质的分析结果显示,该支架的孔隙率可达到(76.01±3.82)%。且具有生物降解性和蛋白吸附性。在37℃条件下,将CS/CMC/MMT-ECM支架浸泡于PBS溶液中,其EGCG释放期达到22 d,累积释放(65.41±2.52)%的EGCG后达到平衡。考察该支架对HUMSCs增殖和向成骨分化能力的影响,结果显示,相比于直接包裹EGCG 的 CS/CMC/MMT-EGCG 支架,HUMSCs 在 CS/CMC/MMT-ECM 支架上表现出更强的向成骨分化能力,表明所构建的CS/CMC/MMT-ECM支架能有效的发挥EGCG缓释能力,具有作为骨组织工程支架材料的潜能。
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