目的:探索葡萄籽原花青素(GSPs)对结肠癌细胞株SW480和SW620氧自由基(ROS)产生的影响,并在筛选出的受GSPs调控的基因中,探索调控ROS相关的基因,并进一步对调控ROS相关基因的生物学功能进行研究,阐述其调控机制,为结肠癌的诊疗提供有效的分子靶标与新的治疗手段。方法:首先,用GSPs处理结肠癌细胞,然后用DCFH-DA染色检测细胞内ROS产生情况,结合转录组测序结果筛选出受GSPs调控且调控ROS产生的靶基因,并通过荧光定量PCR及Western Blotting验证其表达。随后,我们利用靶基因特异性抑制剂抑制其表达,观察其细胞生物学功能的改变,验证靶基因对结肠癌细胞生物学特征的影响,如MTT测细胞增殖,流式检测细胞周期和凋亡,细胞划痕检测迁移能力及细胞克隆实验。进一步,我们利用软件预测靶基因上游调控转录因子,在验证其为GSPs调控基因后,通过siRNA干扰技术验证其对靶基因的调控作用。结果:在SW480和SW620两细胞中,GSPs处理结肠癌细胞后可使胞内ROS生成增加。在前期筛查的GSPs调控基因中,我们发现FoxM1的表达与ROS产生存在负相关。通过FoxM1特异性抑制剂下调该基因表达后,可导致ROS生成显著增加,此结果与GSPs处理后观察的现象一致。细胞生物学特征表现为:FoxM1表达抑制后可使细胞增殖下降,细胞周期发生S期阻滞,细胞凋亡增加,细胞迁移和克隆形成能力都受到抑制。利用软件预测FoxM1上游调控转录因子POU2F1,siRNA干扰其表达后,可引起FoxM1的转录水平下降,同时该基因也为GSPs下调基因。结论:(1)FoxM1为GSPs调控的靶基因,其表达受到GSPs的负调控,且与ROS产生存在负反馈,FoxM1的特异下调使结肠癌两细胞生物学特征明显受到影响;(2)机制研究显示GSPs通过抑制POU2F1的表达,进而抑制FoxM1的转录。