解淀粉芽胞杆菌微粉剂的研制及对黄瓜棒孢叶斑病的防治研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:lrdw149
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黄瓜棒孢叶斑病是目前生产中最严重的、最难防治的病害之一。目前,由于该病以化学防治为主,抗药性问题严重,对黄瓜产品造成了污染风险,急需绿色防控产品。本论文以黄瓜棒孢叶斑病为靶标,筛选出1株对其具有较好拮抗效果的芽胞杆菌,并对芽胞杆菌的发酵及喷雾干燥工艺进行优化,进行微粉剂配方的研制以及对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果研究,成功研制出设施黄瓜专用的生物微粉剂,主要结果如下:1.筛选并鉴定出1株解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),对黄瓜棒孢叶斑病菌有显著的防治效果。本研究从辽宁、山东、河北等病害发生严重地区的土样中分离纯化得到1株对多主棒孢菌具有较强拮抗作用的拮抗细菌并命名为ZF57。菌株ZF57对多主棒孢菌的平板抑制率达到64.85%,对其他7种常见病原真菌也具有较好的抑制效果。离体叶片条件下,菌株ZF57对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果达到66.67%;盆栽条件下该菌对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果为58.73%;在田间条件下,该菌株的防治效果可以达到62.13%。通过形态学观察、生理生化特性、Biolog测定及16S rDNA序列分析,将菌株ZF57鉴定为解淀粉芽胞杆菌B.amyloliquefaciens,对其进行利福平抗性驯化,验证发现驯化过程对菌株ZF57未产生不良影响,可以以驯化株ZF57-rif作为后期试验材料。2.优化了解淀粉芽胞杆菌ZF57-rif发酵培养基组份、发酵条件和喷雾干燥条件。确定了解淀粉芽胞杆菌ZF57-rif发酵培养基的最佳配方为:山梨醇10 g/L、棉籽饼粉17g/L、NaH2PO4 0.5 g/L、Na2HPO4 0.4 g/L,初始pH 7.0;最适发酵条件为:装液量80 mL/250mL三角瓶、接种量2.1%、30℃、180 r/min条件下培养32 h。对喷雾干燥条件进行优化,确定最佳进风口参数温度160℃,以白炭黑:硅藻土=1:3作为干燥载体,载体含量为10%。3.筛选出一种可以促进生防菌在黄瓜植株上定殖的营养助剂,明确了解淀粉芽胞杆菌微粉剂的最佳配方。以质量分数为50%的解淀粉芽胞杆菌粉作为有效成分,29%的硅藻土为主要载体,10%的白炭黑第二载体,1%的木质素磺酸钠作为分散剂,4%的十二烷基硫酸钠作为表面活性剂,1%羧甲基纤维素钠作为保护剂,5%的棉籽饼粉作为营养助剂而研制的解淀粉芽胞杆菌微粉剂。解淀粉芽胞杆菌微粉剂平均粒径8.31μm,分散指数98.16%,浮游性指数85.37,含水率1.42%,坡度角68°,各项检测结果均符合标准。解淀粉芽胞杆菌微粉剂在田间防治黄瓜棒孢叶斑病的相对防治效果可达到80.16%,高于对照化学药剂的相对防治效果。
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