大蒜素联合5-FU对腺样囊性癌ACC-M裸鼠移植瘤抑制作用的研究

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目的:探讨大蒜素联合5-FU对腺样囊性癌ACC-M裸鼠移植瘤生长的抑制作用,为其用于临床治疗腺样囊性癌提供一定的理论基础和实验依据。方法:将30只5-6周龄,体重(18±2)g的Balb/c裸鼠在SPF级动物房饲养一周。将常规培养的腺样囊性癌ACC-M细胞,用PBS缓冲液调整细胞浓度为2×107/ml,于裸鼠右前肩胛区皮下注射0.2m L接种,建立ACC-M细胞裸鼠移植瘤模型。造模2W后挑选长径(a)约5mm的裸鼠24只,随机分为实验组(大蒜素组、5-FU组和大蒜素联合5-FU组)和对照组(PBS组),每组各6只。各实验组按照体重0.01ml/g腹腔注射药物,大蒜素组、5-FU组注射大蒜素和5-FU浓度均为20mg/ml,联合组注射大蒜素20mg/ml加5-FU20mg/ml。对照组注射等量PBS液,每两天一次,共3次,末次注射6天后处死动物,完整取出瘤体组织。实验过程中观察裸鼠饮食、活动及对外界反应。从第一次给药当天至第10天,每两天测量移植瘤的体积变化,共计6次,绘制肿瘤生长曲线。HE染色观察移植瘤的病理学改变。结果:1.本实验成功建立人腺样囊性癌ACC-M裸鼠皮下移植瘤模型,在接种后2W皮下出现瘤样包块,直径约5mm,移植瘤成瘤率为100%。2.药物干预前裸鼠饮食、活动无明显改变,至处死当天对照组裸鼠饮食、活动及对外界反应较实验组明显减退。实验过程中24只裸鼠无死亡。3.移植瘤体积比较结果:随时间变化,裸鼠移植瘤体积有增大的趋势,各组移植瘤体积的变化幅度不同,对照组移植瘤体积增长迅速且明显,大蒜素组、5-FU组、大蒜素+5-FU组移植瘤增大程度低于对照组,大蒜素+5-FU组增大程度最低(p<0.05);给药前各组平均瘤体积差异无统计学意义(p>0.05);治疗结束后各实验组移植瘤体积明显小于对照组(p<0.05),5-FU组体积明显小于大蒜素组(p<0.05),大蒜素联合5-FU组与大蒜素组比较(p<0.05),及与5-FU组比较(p<0.05),差异均有统计学意义。4.HE染色结果显示:对照组肿瘤细胞片状分布密集,大小较一致,胞核大染色深,异常核分裂相较多见,无明显坏死区域;大蒜素组肿瘤细胞分布相对稀疏,坏死细胞占肿瘤细胞比例小于10%;5-FU组瘤体组织出现大块坏死区域,坏死细胞占肿瘤细胞比例约为30%;大蒜素联合5-FU组瘤体组织可见纤维增生,肿瘤细胞肿大变性,坏死细胞占肿瘤细胞比例约为60%。结论:1.采用裸鼠皮下接种ACC-M细胞造模是一种良好的人腺样囊性癌造模方法。2.大蒜素、5-FU单独使用以及大蒜素联合5-FU对裸鼠体内ACC-M细胞移植瘤的生长均有明显的抑制作用,大蒜素联合5-FU对移植瘤的抑制作用明显强于单独应用。
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