磷酸化胰岛素生长因子结合蛋白对四种癌细胞的影响

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目的 为探讨IGFBPs对IGFs的功能调节作用机理和抗肿瘤作用。 方法 采用基因工程重组人IGF-2(rhIGF-2),应用Phenyl Sepharose和DEAE Cellulose技术,从孕妇羊水中纯化磷酸化的BP-1(pBP-1)和非磷酸化的BP-1(npBP-1),自37例四种原发性癌实体瘤和癌性腹水标本中获取瘤细胞。实验设五个组在体外培养,分别为对照组,IGF-2+pBP-1组,IGF-2+npBP-1组,pBP-1组和npBP-1组。在培养后72小时分别对上述各组细胞作如下检测:①采用MTT试验检测细胞生长动力学;②制备IGF-2cDNA探针,以地高辛标记与培养细胞作膜上斑点杂交,分别定性和定量测定培养细胞中IGF-2mRNA的表达。 结果 ①从羊水中成功纯化了28kd的pBP-1和npBP-1。②MTT试验和膜上斑点杂交经光密度扫描表明各组细胞在培养72小时时,显示均有IGF-2mRNA阳性信号,pBP-1组肝癌和乳腺痛细胞的IGF-2mRNA表达平均光密度值(OPTMD)与对照组和其他各组比较均有显著差异(P<0.01),npBP-1及其他组则无明显差异。 结论 ①pBP-1在体外可抑制肝癌和乳腺癌细胞的IGF-2mRNA表达,而npBP-1、IGF-2+pBP-1和IGF-2+npBP-1无此作用;②IGF-2mRNA表达与癌细胞生长可能密切相关,pBP-1参与了生长抑制调节作用。
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