小麦条锈病是我国小麦生产上重要的病害,其流行性强,分布广,危害严重。国内外大量实践证明,利用品种抗病性防治麦类锈病是最为经济而有效的重要措施之一。然而,由于条锈菌毒性变异频繁,新的毒性小种不断出现,往往导致小麦品种抗锈性失效。要培育持久抗病的小麦品种就要加深对小麦与小麦条锈菌互作调控机制的了解。小麦与条锈菌的互作符合典型的“基因对基因”假说,即小麦品种有一抗病基因R,条锈菌就会有与之对应的无毒基因Avr,表现为抗病反应。因此,从寄主的抗病基因和病原菌的无毒基因入手,深入解析无毒基因和抗病基因的互作机制,对合理利用小麦的抗锈性具有重要意义。本项目在前期完成的小麦条锈菌全基因组测序基础上,通过生物信息学筛选目标基因;构建候选基因的PVX表达载体,利用农杆菌介导的病毒表达系统在烟草中进行瞬时表达,通过分析其是否参与诱导细胞死亡或者抑制BAX诱导的细胞死亡,明确目标基因的毒性或者无毒功能。主要研究结果如下:1、通过TargetP、SignalP3.0、TMHMM2.0对条锈菌CYR32号小种的分泌蛋白进行预测,并通过软件过滤掉具有跨膜区的分泌蛋白,最后挑选富含半胱氨酸（半胱氨酸数量≥4）且编码蛋白小于300个氨基酸,筛选获得140个候选基因;设计ORF引物,通过PCR在CYR32号夏孢子及其病菌侵染小麦后168h的样品中进行基因扩增及克隆测序,获得60个目标基因;2、构建60个目标基因的PVX载体,将构建好的目的基因转入农杆菌感受态中,取6叶期长势良好的本氏烟草,通过注射的方法在烟草中瞬时表达,注射后5-10d观察症状。实验结果显示目标基因均不能直接诱导坏死也不能抑制由BAX引起的细胞程序性死亡,初步表明60个目标基因在烟草中不具有无毒功能,但在小麦中的具体功能有待于在小麦中分析验证。