目的：观察转铁蛋白(transferrin)和胰岛素(insulin)对人皮肤成纤维细胞(Fibroblast)增殖的影响，探讨在短时间内获取大量具有较强活力的成纤维细胞的最佳培养模型，为临床应用研究提供实验依据。 方法：取正常的新鲜皮肤组织，分离出成纤维细胞并进行原代培养；之后进行传代培养以获得足够量的检测用细胞；用MTT法分别检测转铁蛋白、胰岛素及转铁蛋白和胰岛素联合应用后对人皮肤成纤维细胞增殖的影响。 结果： 1．原代培养第7天，可见少量长梭形、透明的成纤维细胞牵出，之后细胞逐渐增多，成纤维细胞可见2-5个胞浆伪足。当细胞爬满培养瓶底时，密集成片的细胞呈条索状，片状分布，细胞核呈椭圆形，较小，位于细胞中央。多次传代培养后成纤维细胞呈优势生长，第3代以后的细胞绝大部分形态为梭形，显示为成纤维细胞。取传代后的第4-6代细胞进行实验。 2．MTT法检测转铁蛋白对人皮肤成纤维细胞生长情况的影响：第1天浓度为5、10、50和100μg／ml的转铁蛋白与正常对照组有显著差异(P＜0.05)，至第2天起所有浓度的转铁蛋白与正常对照组有非常显著差异性(P＜0.001)。转铁蛋白在1-100μg／ml和5d范围内表现为浓度-时间依赖效应，最佳效应浓度为10μg／ml，最大效应在用药后3d。此时，试验组的成纤维细胞OD值(0.807±0.034)与对照组(0.310±0.019)有显著差异性(P＜0.001)。 3．MTT法检测胰岛素对人皮肤成纤维细胞生长情况的影响：第1天浓度为5、10、50和100μg／ml的胰岛素与正常对照组有着明显差异性(P＜0.05)，从第2天开始上述浓度的胰岛素以及1μg／ml的胰岛素与正常对照组有着非常明显的差异性(P＜0.001)。1-100μg／ml和5d范围内成纤维细胞的增殖呈浓度-时间依赖效应。本实验中最佳浓度为100μg／ml，最大效应在用药后3d。此时，成纤维细胞的为OD值(0.785±0.035)与对照组(0.310