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超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)能够催化超氧阴离子自由基发生歧化反应生成过氧化氢和氧,随后在过氧化氢酶的催化下,将过氧化氢分解为水和氧。SOD制剂在医疗、食品和化妆品领域有着广泛的应用。通过化学修饰的方法改变SOD的结构,使其稳定性得到加强才能实现扩大应用范围的目的。内蒙古有着丰富的畜产资源,全区每年羊的屠宰量达到1.5亿只,大量的羊血资源未被充分利用。羊血当中含有丰富的SOD,本研究用新鲜羊血为实验材料,采用用有机溶剂变性去除杂蛋白,首先得到SOD粗制品,同时摸索关键提取条件(最佳铜离子浓度和变性温度),然后采用柱层析技术进行纯化得到SOD纯品,利用NBT-活性染色法蛋白染色鉴定SOD,邻苯三酚法测定SOD的活性,同时对其进行光谱扫描和H202敏感性实验等性质分析。选用聚乙二醇(PEG-6000)、牛血白蛋白、月桂酸分别对羊血SOD进行化学修饰,得到三种SOD修饰酶。最后对修饰SOD作氨基酸组成分析、修饰率测定,热稳定性研究和抗酶解研究。研究结论如下:1、1000ml羊血中得到SOD干粉1257mg,总活力为79453U,比活力为3871.4U/ml。理化性质分析表明该酶的最大紫外吸收波长为262nm,对H202敏感。通过非变性凝胶电泳NBT活性染色和SDS-聚丙烯酰胺电泳,结果证明羊血SOD有两条带,SOD亚基分子量分别为16.71KDa,15.97KDa。2、经过三种试剂月桂酸、牛血清白蛋白、PEG-6000修饰SOD,通过活性测定以及SDS-PAGE,证明修饰后SOD仍然具有活性,并且分子量发生了改变。三种修饰SOD的修饰率分别是84.2%(月桂酸), 71.8%( PEG-6000)、44.7%(牛血清白蛋白)。三种修饰SOD所得剩余酶活力分别是2943.7U/ml(月桂酸)、2791.5 U/ml(牛血清白蛋白)、2379.4 U/ml(PEG-6000),月桂酸修饰后酶活保持率达到了89.6%、牛血清白蛋白修饰后酶活保持率为84.8%、PEG-6000修饰后酶活保持率为72.4%。三种修饰SOD的热稳定性和抗酶解能力能分别是月桂酸修饰﹥牛血清白蛋白修饰﹥PEG-6000修饰。3、对羊血SOD和三种修饰SOD进行氨基酸组成分析,预测了三种修饰剂对SOD可能修饰位点。本研究结果将为SOD的化学修饰、动物血资源的深度利用提供理论依据。