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多糖的提取方法有很多种,每一种都有其优点与缺点。除多糖提取率、多糖含量这样的指标外,不同提取方法得到的多糖的单糖组成、结构及生物活性是否有显著差异,多糖的构效关系如何,这些都成为确定提取方法的条件和依据。因此研究不同提取方法对多糖的结构及活性的影响,为多糖提取方法的选择提供一定的理论基础。本文应用传统水提和水提残渣碱提得到茶树菇多糖,采用气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)、傅里叶变红外色谱(FT-IR)、核磁共振(NMR)等方法测定其一级结构及高级结构,采用粒度仪、热分析仪、环境扫描电镜(ESEM)及原子力显微镜(AFM)研究其溶液构象及糖链结构,并对比4种多糖生物活性,分析碱液提取对多糖的影响,主要研究结果为：1.水提得到茶树菇多糖S-ACP,并对水提残渣进行碱提得多糖J-ACP。分别用考马斯亮蓝G-250法及苯酚-硫酸法测定蛋白含量及总糖含量,GC分析单糖组分,AFM观测结构形貌,并进行了体外抗氧化活性测定。对S-ACP和J-ACP采用季铵盐沉淀(CTAB)法和凝胶柱层析法进行分离纯化,分别得到2个组分,为S-ACP2-1、S-ACP2-2和J-ACP2-1、J-ACP2-2。对这4个组分进行对比分析：结构、溶液行为及生物活性。2.水提和碱提茶树菇粗多糖的比较：J-ACP的提取率4.86%远远大于S-ACP的提取率1.83%,通过对比单糖组成及摩尔比可知,碱液可以提取出水提得不到的鼠李糖,并且增加了葡萄糖的量,因此使得碱提的提取率大大增加。抗氧化活性结果显示S-ACP活性高于J-ACP,分析原因可能与粗多糖中含有的蛋白质的含量有关。3.水提和碱提茶树菇纯化多糖结构的比较：4种多糖均由木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其中S-ACP2-1、J-ACP2-1的分子量较大,分别为8.72x105Dal、6.56×105Dal; S-ACP2-2、J-ACP2-2的分子量较小,分别为2.09×104Dal、2.05×104Dal。4种多糖的糖残基主要以β-吡喃构型。碱提所得的多糖两个组分相比于水提得到的两个组分在单糖组成及糖链连接等结构方面变化不大,可见水提、碱提粗糖采取相同的纯化方法得到的多糖在结构上具有一定的相似性。4.水提和碱提茶树菇纯化多糖溶液行为及链结构的比较：粒度测定结果表明水提茶树菇多糖在酸性条件下粒度最小,碱提多糖在中性环境中最不容易发生聚集。CD测定结果表明：S-ACP2-2和J-ACP2-2在中性水溶液中主要以无序结构存在,其中S-ACP2-2中有少量有序构象；S-ACP2-2在酸性环境下构象改变较小,碱性环境下会发生突变；J-ACP2-2在酸性、碱性环境中都会发生突变,碱性环境的突变更加明显。刚果红实验结果表明S-ACP2-2和J-ACP2-2在水溶液中均以自由卷曲构象存在。热分析结果表明4种多糖的热性质基本相似,碱提茶树菇多糖J-ACP2-1、 J-ACP2-2的热性质略高于水提茶树菇多糖S-ACP2-1、S-ACP2-2,在热降解过程中碱提多糖的焓变值是水提多糖的2倍多。ESEM观测显示碱提多糖分子间斥力作用较强,在干粉存在状态下,聚集体较小。对比AFM观测结果,说明在中性环境中,碱提多糖的分子链连接较短,分布均匀分散,而水提多糖通过分子间作用交织成柔性长链。由此可知,碱液提取对茶树菇多糖的溶液行为及链构象有一定的影响。5.水提和碱提茶树菇纯化多糖生物活性的比较：体外抗氧化活性测定,4种多糖均具有对DPPH的清除作用,且多糖浓度和清除率呈正相关关系,当浓度>0.4mg·mL-1,J-ACP2-2的清除率与S-ACP2-2对比达到显著水平,并在0.8、1.0mg·mL-1时达到极显著水平；抗肿瘤活性测定,4种多糖均具有对K562细胞的抑制作用,抑制率J-ACP2-2>S-ACP2-2,并且在浓度100、200、400ug·mL-1时达到极显著水平。可见碱液作用的多糖J-ACP2-2活性高于S-ACP2-2。对比于4种多糖的结构和溶液性质,可知碱液提取的多糖与水提的相比,一级结构基本相似,但是其溶液性质有较大差别,因此造成了多糖生物活性显著性的差异。6.采用多升温速率法研究了茶树菇多糖S-ACP2-2的热分解动力学：S-ACP2-2热分解第2步过程的活化能Eα为115.947kJ·moL-1,指前因子1nA为27.641s-1,其最佳微分动力学方程为