MgONPs抗青枯雷尔氏菌机理及对烟草青枯病控制作用研究

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镁作为一种重要的矿物元素,参与植物防御反应和新陈代谢等活动,对植物生长发挥着重要作用。纳米材料具有较大比表面积和较小尺寸效应等优良的物理和化学特性,比普通材料具有更好的抗菌能力。如今,随着科学技术的发展,纳米技术正逐渐成为控制农作物病害的新型工具。青枯病是由青枯雷尔氏菌Ralstoniasolanacearum(R.solanacearum)侵染的一种细菌性病害,可导致烟草毁灭性死亡,但是目前缺乏行之有效的办法。本文通过研究纳米氧化镁(MgONPs)对植物病原菌青枯雷尔氏菌的抗菌机理及其对青枯病的防控作用,结合对植物生长的影响,提出了MgONPs用于防治植物性病害的新用途,为纳米材料在农作物病害防治中的应用研究提供了理论依据,也为烟草青枯病的防治提供一种新思路。本论文主要研究结果如下:  1、MgONPs材料表征,并初步测定其对青枯雷尔氏菌的抗菌活性。采用动态光散射(DLS)、透射电镜(TEM)、扫描电镜(SEM)和电势测定(Zeta)对MgONPs进行表征,结果表明,实验所用MgONPs平均粒径为50-100nm;测定MgONPs对青枯雷尔氏菌的抗菌活性,结果表明,最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)分别为200和250mg/L,而普通氧化镁(bulkMgO)依次为500和600mg/L;菌落计数方法和生长曲线结果表明,MgONPs的抗菌性显著强于bulkMgO,且二者的抗菌活性具有明显的浓度依赖性。  2、MgONPs对青枯雷尔氏菌的毒性机理研究。结果表明,MgONPs能抑制青枯雷尔氏菌的运动性和生物膜的形成;溶液中带正电荷的MgONPs能吸附带负电荷的青枯雷尔氏菌,通过SEM和TEM也观察到MgONPs大量聚集在青枯雷尔氏菌细胞表面,细胞结构损伤严重;MgONPs损伤细菌细胞膜,引起细胞质泄露;检测到大量ROS的积累可能是导致DNA损伤的重要原因。  3、MgONPs对烟苗生长的影响研究。结果表明,MgONPs对烟草种子无毒害效应,但与清水对照相比也无促进效果;测定对烟草幼苗生长的影响,结果表明,灌根施用50mg/L-250mg/L浓度的MgONPs30d后,烟草根长和株高都显著增强,且干物质积累增多,与清水对照相比具有显著性差异;检测到MgONPs处理后烟草各部位镁元素含量明显升高,得出MgONPs能被植物根部吸收,通过维管束运输至植株各部位;MgONPs促进了烟草叶绿素含量增加,增强光合作用,且相对含水量也升高;SEM和石蜡切片观察到MgONPs处理后烟草叶片叶肉细胞正常、茎部的栅栏组织增多;以上研究表明灌根施用50mg/L-250mg/LMgONPs有利于植株健康生长。  4、MgONPs对烟草青枯病的防治效果研究。盆栽试验结果表明,MgONPs对青枯雷尔氏菌前期侵染的抑制效果较好,后期防治效果减弱。在处理21天时,250mg/LMgONPs相比对照组病情指数(98.50),250mg/LMgONPs处理后烟草病情指数为62.50,bulkMgO处理后病情指数为93.20;田间试验结果表明,相比对照,MgONPs和bulkMgO处理后青枯病发病率分别减少了38.83%和13.06%;且MgONPs和bulkMgO处理后促进烟草植株生长,其中MgONPs对团棵期、旺长期和现蕾期的叶长、叶宽、叶面积等指标大于bulkMgO和清水对照处理。因此MgONPs能安全有效进行烟草病害防治。
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