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关节软骨缺损的修复是临床工作中极具挑战性的课题。受损的软骨自身修复能力差,在酶的破坏及机械的磨损双重作用下进一步发生退变,终致关节功能的严重损害。对于严重的关节软骨退变的患者,人工假体置换是临床最常用的治疗方法,但是应用假体存在感染、松动及断裂等并发症。更好的方法为应用生物学的手段,由结构及功能可以满足需要的新生组织重新覆盖缺损部位,以避免软骨的进一步退变。多年来人们尝试了多种方法,包括软骨前体细胞转移、骨膜软骨膜移植、软骨下钻孔、自体或异体软骨移植及应用生长因子等。现有的方法都不能完全满足临床的需要,有必要发展新的修复技术。 骨折发生后,急性炎症发应带来大量的细胞及分子,聚集的炎性细胞及介质为间叶的前体细胞提供了一个迅速增殖的环境,在断裂部位形成胚芽组织。骨折后的胚芽组织(repair blastema)有可能用作关节软骨缺损修复的自体移植物。本实验对骨折胚芽组织修复关节软骨缺损的可行性进行研究。 材料和方法 将10只6月龄的雌性新西兰白兔随机分为两组。 第一次手术:准备骨折后胚芽组织。用速眠新(0.2mL·kg-1 im)麻醉新西兰白兔,术区剪毛,术中按无菌原则操作,后续手术均依此方法进行。随意选择兔一侧桡骨,造成0.5cm骨缺损。 第二次手术:将骨折后胚芽组织移植入软骨缺损部位。一周后,取出骨缺损部位新生组织。取兔双侧后肢膝内侧切口,将髌骨向外脱位,显露股骨髁部关节面,于股骨股髌关节面中央处钻孔,制成直径3mm全层关节 第四军医大学硕士学位论文软骨缺损。随机选择一侧,植入备好的胚芽组织。对侧缺损未作移植,以供对照。 所有的动物允许在笼内自由活动。4周及24周后分别取一组兔股骨远端标本,于 10%福尔马林中固定 24小时,5%硝酸溶液脱钙 3—4天,常规石蜡包埋切片,分别行 HE及蒋维中改良 Mallory’三色法染色。于光镜下观察,依O’Drisc。11标准进行组织学半定量计分。 结果: 大体观察结果:所有关节无感染迹象。移植后4周修复组较之对照组关节面更为平整,表面为浅黄色半透明,修复组织与正常组织界限模糊。对照组缺损部位与正常组织界限清楚,有不同程度的修复组织出现,表面主要为褐色。移植后24周缺损部位与正常软骨相仿,对照组表面为褐色或紫红色,表面不规则。 组织学结果:移植组 4周及 24周组织学计分结果分别为 14.4和16.4,对照组分别为4.8和4刀。对照组缺损部位由纤维软骨或纤维组织充填,不能恢复关节面的连续性。移植组缺损部位由高细胞密度的组织充填,在高倍镜下观察到的细胞类似分化良好的软骨细胞,并被基质所包绕。大多数修复组织与周围正常组织结合良好,只有少部分存在裂隙。24周后修复组织保持软骨表型。未观察到表面的纤维化或裂开等现象,修复软骨的厚度介于正常软骨乃一95%之间。 结论 本研究尝试将骨折后胚芽组织做为移植物修复关节软骨缺损,结果表明该移植物可以较好地修复软骨缺损。 将该组织移植至缺损部位,聚集的前体细胞可分化为软骨细胞,经过24周,仍维持软骨表型。可能的原因为关节内环境和骨折部位不同,存在关节液的营养、调节因子及生物力学作用的正性影响。 .3. 第四军医大学硕士学使论文 对照组关节软骨缺损随时间逐渐退变,不能恢复关节表面的连续性,此结果与文献中直径3mm的缺损不能自发修复相一致。