论文部分内容阅读
细胞免疫芯片是以蛋白质芯片技术为基础,利用细胞表面的抗原与其相应的特异性抗体产生抗原-抗体反应,并借助显微镜直接观察细胞结合情况,检测细胞表面抗原是否存在的一类生物芯片技术。利用细胞免疫芯片技术可以同时检测多种细胞表面抗原,具备生物芯片高通量的特点。本文对有关细胞免疫芯片的试验条件进行了优化研究,并对细胞免疫芯片技术在白血病免疫分型和消化道肿瘤标志物的检测方面进行了探索性研究,取得了较为满意的结果。为了管理细胞免疫芯片的数据,设计开发了“细胞免疫芯片检测系统”软件。论文的主要工作包括:1.对细胞免疫芯片的制备进行了研究。我们选用CD45单克隆抗体制备细胞免疫芯片,与白细胞悬液反应,观察在不同细胞浓度、不同抗体固定时间和不同孵育时间下,CD45单克隆抗体与白细胞的结合效果,优化实验条件,为基于固定化单克隆抗体的细胞免疫芯片的研制和应用奠定实验基础。2.细胞免疫芯片技术在白血病免疫分型方面的初步应用。在一片芯片上同时固定M2a型白血病相关表面抗原的单克隆抗体(CD13、CD14、CD15、CD33、CD34、CD45和HLA-DR),与M2a型白血病血样反应,获取芯片图像,与临床流式细胞仪结果对照,临床符合性较好。3.细胞免疫芯片技术在消化道肿瘤标志物检测方面的初步探索。在一片芯片上同时固定多种消化道肿瘤标志物的单克隆抗体(P21、P27、P53、CD44V6-e、C-met、CDK4、HMM-7和MG7),证明上述8种标志物都有阳性结合点,验证了利用细胞免疫芯片技术检测消化道肿瘤标志物的可能性。4.细胞免疫芯片检测系统的研制。为了解决细胞免疫芯片数据管理的问题,设计开发了“细胞免疫芯片检测系统”软件,该系统以数据库的方式贮存了每张芯片上各个抗体点的显微图像和相关信息,以及每张芯片对应的病人资料,实现图像与资料的同步管理。