射精管梗阻对精囊收缩效能影响的实验研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gloriayue
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目的:研究射精管梗阻(Ejaculatory duct obstruction,EDO)不同梗阻程度、梗阻时间对精囊形态学、精囊平滑肌收缩效能及介导精囊平滑肌收缩的肾上腺素能受体α1A亚型、毒蕈碱受体M3亚型表达水平的影响,探讨EDO对精囊收缩效能影响的可能机制,为临床治疗EDO导致的男性不育提供理论支持。方法:选取体重为350~400g的雄性Wistar大鼠共48只,随机均分为3组,通过手术方式将三组制备为完全EDO组、部分EDO组、对照组,于手术后4周、手术后8周分别选取各组一半大鼠取出精囊。通过大体观察及苏木素-伊红染色评估精囊形态学改变;应用离体精囊肌环实验检测精囊平滑肌收缩效能改变;通过透射电子显微镜检查(TEM)观察精囊平滑肌细胞变化;运用Real-time PCR和Western blotting技术分别检测α1A受体亚型和M3受体亚型m RNA表达、蛋白表达水平变化。采用SPSS 26.0软件进行统计学分析。结果:(1)完全EDO组、部分EDO组和对照组大鼠成活率分别为:93.7%、87.5%、100%;建模成功率分别为:100%、85.7%、100%。(2)完全EDO组手术后4周精囊外观呈萎缩状态且精囊分泌物凝固,精囊重量显著减少,平滑肌层变薄,可见较多蓝染结晶体、多核巨细胞和退化的上皮细胞;手术后8周以上损伤改变均加重,部分腺腔内可见结石样物质。部分EDO组手术后4周精囊外观呈膨大状态,精囊重量显著增加,病理组织学表现除平滑肌层稍厚较对照组无明显改变;手术后8周,部分腺腔呈萎缩状态,精囊重量显著减少,平滑肌层明显变薄,可见较多蓝染结晶体和多核巨细胞,未见正常上皮细胞。(3)与对照组相比,盐酸去氧肾上腺素(PE)和氯化乙酰胆碱(Ach)诱导完全EDO组精囊肌环收缩的最大收缩量及收缩频率几乎均明显下降(P<0.01),且随着梗阻时间收缩效能逐渐下降。PE诱导部分EDO组手术后4周精囊肌环收缩效能较对照组无显著差异,而手术后8周最大收缩量及收缩频率均有统计学意义地下降(P<0.01,P<0.05);Ach诱导部分EDO组手术后4周精囊肌环收缩最大收缩量下降(P<0.05)而收缩频率增加(P=0.111),手术后8周最大收缩量及收缩频率均明显下降(P<0.01)。(4)部分EDO组手术后4周超微结构表现为精囊平滑肌代偿与重建,平滑肌细胞增大、线粒体扩张且数量丰富,然而手术后8周表现为平滑肌细胞损伤表现。完全EDO组平滑肌细胞固缩且排列紊乱,线粒体退化且数量减少,细胞间隙增宽,可见大量胶原纤维,以上改变随梗阻时间不断加重。(5)在完全EDO组,α1A受体和M3受体m RNA表达和蛋白表达水平表现为随着梗阻时间而显著下降。在部分EDO组,手术后4周α1A受体m RNA表达和蛋白表达水平较对照组无明显差异,手术后8周表达水平均显著下降;手术后4周M3受体m RNA表达水平无明显改变而蛋白表达水平显著增加,手术后8周二者均呈无统计学意义地下降。结论:(1)本研究成功制备不同梗阻程度EDO大鼠模型,该模型制备简便,效果稳定,易造成梗阻并解除梗阻。(2)完全性EDO会导致精囊出现进行性损伤,包括精囊萎缩、平滑肌层变薄、收缩效能下降、α1A和M3受体蛋白下降,并且EDO能影响α1A和M3受体蛋白基因转录。部分性EDO致使精囊出现代偿机制,随着EDO时间延长逐渐出现失代偿,出现与完全性EDO类似的损伤改变。本研究成功地证实了EDO对精囊收缩效能的影响,从而为治疗EDO后精囊损伤提供理论依据。
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