目的：鹦鹉热嗜衣原体（Chlamydophila psittaci， Cps）是一种严格细胞内寄生，多宿主性的人兽共患病病原体，临床上仍缺乏有效的防治药物。寻找Cps和宿主细胞相互作用的关键效应蛋白，以作为研制防治性药物的靶点是目前衣原体研究的“热点”课题。现有资料表明Ⅲ型分泌系统（Type III secretion system，T3SS）效应蛋白是Cps与宿主细胞相互作用的关键。本研究对预测、筛选的Cps T3SS效应蛋白的定位和表达进行了初步的分析，并进一步对其体外诱导人单核细胞（THP-1）分泌IL-6、IL-1β、TNF-α前炎症因子（CKs）的水平进行了检测。方法：将预测的Cps T3SS效应蛋白编码基因，经原核表达、纯化后获得融合蛋白，用融合蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体，并以多克隆抗体为一抗，采用间接免疫荧光技术检测预测蛋白在感染细胞的定位情况。分别在Cps感染Hela细胞后8h，18h，24h，36h，48h提取蛋白，用制备的一抗通过Western Blot（WB）来观察蛋白表达时相。将多粘菌素B处理过的GST-CPSIT₀271蛋白体外刺激THP-1细胞，并于6h、12h、24h、36h、48h收集细胞，采用ELISA检测IL-6、TNF-α和IL-1β水平。结果：1.构建的10个预测Cps T3SS效应蛋白编码基因的重组质粒：CPSIT₀139，CPSIT₀271， CPSIT₀363， CPSIT₀499， CPSIT₀700， CPSIT₀788，CPSIT₀803，CPSIT₀959，CPSIT₀965，CPSIT₀991，经测序鉴定证实插入片段为目的基因，测序结果与Genbank上登录序列经BLAST比对完全一致；经诱导表达获得6个可溶性表达蛋白，分别是：CPSIT₀139，CPSIT₀271，CPSIT₀363，CPSIT₀700，CPSIT₀788，CPSIT₀959；间接ELISA法测定免疫小鼠血清特异性抗体的效价：CPSIT₀363与CPSIT₀959为1:64000，CPSIT₀700与CPSIT₀788为1:32000，CPSIT₀271与CPSIT₀139为1:16000；2.间接免疫荧光法显示预测蛋白的分布与Cps包涵体的分布位置大致相同；3. WB结果显示CPSIT₀139， CPSIT₀271， CPSIT₀363， CPSIT₀700，CPSIT₀788，CPSIT₀959分别在感染后24h，36h，18h，24h，36h，18h才出现明显的蛋白表达；4.一定浓度的GST-CPSIT₀271蛋白能显著诱导THP-1细胞产生IL-6、TNF-α和IL-1β，当GST-CPSIT₀271蛋白浓度为2μg/mL⁵μg/mL时，CKs的水平与蛋白呈明显的剂量依赖关系；用5μg/mL的GST-CPSIT₀271蛋白刺激THP-1细胞24h时，TNF-α和IL-1β量达到高峰，随后它们的水平逐渐下降，48h时IL-6量达到高峰。结论：1. CPSIT₀139， CPSIT₀271， CPSIT₀363， CPSIT₀700， CPSIT₀788，CPSIT₀959重组蛋白具有良好的免疫原性，能刺激小鼠产生较高效价的抗体；CPSIT₀139，CPSIT₀271，CPSIT₀363，CPSIT₀700，CPSIT₀788，CPSIT₀95可能分布在包涵体内或包涵体膜上；2. CPSIT₀139、CPSIT₀271、CPSIT₀700和CPSIT₀788可能是衣原体在感染晚期表达的基因，CPSIT₀363和CPSIT₀959则可能是感染中期表达的基因；3. GST-CPSIT₀271蛋白能促进THP-1细胞分泌炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β。