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目的:建立小鼠过敏性休克模型,探讨小鼠过敏性休克后咽喉、肺、胃组织中类胰蛋白酶(MCT)和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)的时间变化规律,旨为临床及法医学诊断过敏性休克提供科学、客观的参考依据。方法:(1)50只小鼠随机分为对照组和致敏组。对照组10只,致敏组40只。致敏组于实验第1天腹腔注射致敏原OVA(卵蛋白),1周后加强注射一次。免疫后第3周,尾静脉注射OVA,诱发过敏性休克。致敏组小鼠在尾静脉注射致敏原前腹腔注射Hanks液,1h后颈椎脱臼处死,吸取腹腔液,制成肥大细胞悬液。取1滴于载玻片上,中性红染色。显微镜下随机计数100个细胞,计算脱颗粒肥大细胞百分比。(2)另取小鼠50只,致敏组小鼠分别于致敏后30min、1h、6h、24h颈椎脱臼处死,取咽喉、肺、胃组织,经4%多聚甲醛固定、15%蔗糖脱水后冰冻切片。采用组织原位杂交方法和Image-Pro Plus5.0图像分析系统检测MCT与ECP的含量,用SPSS10.0软件进行单因素方差分析。结果:(1)致敏组小鼠均出现过敏性休克的典型临床表现及体征,100%发生过敏性休克,死亡率为22.5%;肥大细胞脱颗粒百分比明显高于对照组。(2)致敏后小鼠咽喉、肺、胃组织MCT与ECPmRNA平均光密度均高于正常对照组。咽喉、肺、胃MCTmRNA在致敏后30min达到高峰,随后逐渐下降,24h后仍高于正常水平;咽喉ECPmRNA在致敏后30min升高,随后保持高水平;肺组织ECPmRNA在致敏后6h其表达突然增高并达到高峰,随后开始下降,24h后仍维持较高水平;胃组织ECPmRNA则在24h后表达增高。结论:(1)本实验成功地建立了小鼠过敏性休克动物模型,证明了卵蛋白对小鼠具有高致敏性。(2)过敏性休克小鼠咽喉、肺、胃组织MCT与ECP mRNA随致敏时间呈现一定的时间变化规律。MCT与ECP分别在速发相和迟发相过敏反应中发挥作用,为过敏性休克的法医学鉴定和临床诊断提供依据。