【摘 要】
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目的:比较IL-6和TGF-β1在促进滑膜细胞向软骨细胞转化过程中的作用及相互关系,探究两者在滑膜软骨瘤病发生中可能起到的作用。方法:取正常成人髌上囊滑膜组织,在无菌环境下
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目的:比较IL-6和TGF-β1在促进滑膜细胞向软骨细胞转化过程中的作用及相互关系,探究两者在滑膜软骨瘤病发生中可能起到的作用。方法:取正常成人髌上囊滑膜组织,在无菌环境下分离及培养。滑膜细胞传至第3代时,用流式细胞术检测滑膜细胞系纯度,此后加入不同培养基进行培养。在第2天和第4天时,对实验标本进行检测。实验分为A、B、C、D、E、F 6组,每组按顺序依次添加普通培养基和分别含100ng/ml IL-6+sIL-6R、100ng/ml IL-6+sIL-6R+10μmol/ml TGF-β1阻断剂、100ng/ml sIL-6R+10ng/ml外源性TGF-β1、10ng/ml外源性TGF-β1、100ng/ml IL-6+sIL-6R+10ng/ml外源性TGF-β1的培养基。培养至第2天和第4天时,对标本进行检测。每个分组均行SOX9免疫荧光检测、Ⅱ型胶原免疫荧光检测和蛋白聚糖ELISA检测。Image J软件行免疫荧光强度测定,采用SPSS25.0软件对不同时间段组间及组内实验数据进行比较。结果:Ⅱ型胶原及SOX9各实验组免疫荧光强度检测提示,100ng/mlIL-6+sIL-6R+10ng/ml外源性TGFβ1高于其他5组(P<0.05),100ng/mlsIL-6R+10ng/ml TGF-β1、10ng/ml TGF-β1高于剩下3组(P<0.05),100ng/mlIL-6+sIL-6R、100ng/mlIL-6+sIL-6R+10μmol/mlTGF-β1阻断剂高于空白组(P<0.05),而100ng/mlsIL-6R+10ng/ml TGF-β1与10ng/mlTGF-β1之间、100ng/mlIL-6+sIL-6R与100ng/ml IL-6+sIL-6R+10μmol/mlTGF-β1阻断剂之间的表达量无统计学差异(P>0.05)。ELISA检测结果提示蛋白聚糖表达量的比较结果与免疫荧光结果相同。含IL-6或TGF-β1的分组与空白对照组相比均表现出显著差异性(P<0.05)。除空白对照组及含100ng/ml IL-6+sIL-6R组SOX9免疫荧光测量结果呈现一致性(P>0.05)外,其它组别的SOX9和Ⅱ型胶原免疫荧光测量结果和蛋白聚糖表达量在不同时间点均表现出显著差异性(P<0.05)。结论:TGF-β1与IL-6均能促进膝关节滑膜细胞向软骨细胞转化,但TGFβ1的促进作用更强且两者很可能通过不同的途径产生作用。
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