【摘 要】
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灰飞虱Laodelphax striatellus(Small brown planghopper,SBPH)属于半翅目飞虱科,以口器刺吸水稻汁液造成为害并传播水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)引起水稻条纹叶枯病。RSV由灰飞虱通过持久循回增殖型方式传播。SBPH通过化学感受系统,识别信息完成寻找宿主、配偶、选择产卵场所等诸多行为。气味结合蛋白作为嗅觉信号传递的起始蛋白,具
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灰飞虱Laodelphax striatellus(Small brown planghopper,SBPH)属于半翅目飞虱科,以口器刺吸水稻汁液造成为害并传播水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)引起水稻条纹叶枯病。RSV由灰飞虱通过持久循回增殖型方式传播。SBPH通过化学感受系统,识别信息完成寻找宿主、配偶、选择产卵场所等诸多行为。气味结合蛋白作为嗅觉信号传递的起始蛋白,具有识别气味分子并发生信号转导的功能。目前病毒-昆虫-植物三者之间的互作关系已经成为研究热点,但是RSV侵染对灰飞虱定位寄主的影响缺乏研究。本论文通过H型嗅觉仪研究携带RSV病毒和不带RSV病毒的灰飞虱对寄主定位能力差异;从转录组水平鉴定与分析灰飞虱气味结合蛋白;利用实时荧光定量法及显微注射法研究RSV侵染调控LsOBP3影响灰飞虱寄主定向行为的机制。结果如下:(1)通过免疫荧光显微镜首次发现RSV可以侵染灰飞虱的触角,其中RSV在梗节的板型感器Pos及鞭节上均有显著表达。利用H型嗅觉仪发现RSV影响灰飞虱若虫寄主定位能力,携带病毒的灰飞虱若虫比不带RSV病毒的灰飞虱若虫定位能力减弱。(2)通过灰飞虱的触角转录组分析,鉴定出14个LsOBPs,根据表达谱分析和q-RCR验证,LsOBP表达存在组织、性别差异性,其中LsOBP1,2,5,6,7,10在触角中高表达,而LsOBP3,4,9,1 1,12在头部高表达,仅LsOBP13在足中高表达。LsOBP4,11,15在雌性组织更高水平表达,而LsOBP3,7,8和10在雄性组织更高水平表达。(3)对无毒和带毒灰飞虱头部LsOBPs的q-RCR定量,发现RSV病毒侵染会引起灰飞虱气味结合蛋白LsOBP2,3,4,5表达量的显著下降。干扰LsUBI后,能显著抑制灰飞虱触角中RSV的侵染,而RSV量的减少会导致LsOBP3表达量上升,进一步表明RSV侵染抑制了 LsOBP3的表达。通过RNAi和H型嗅觉仪测定法表明,RNAi沉默LsOBP3表达后,若虫对水稻响应下降了 40.2%,其寄主定位能力受到抑制。因此我们推测RSV侵染抑制了 LsOBP3的表达、从而引起介体灰飞虱的寄主定位能力减弱。
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