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1.铁皮石斛药材质量标准研究目的对铁皮石斛药材质量进行系统研究,以期建立企业药材质量标准。方法①红外光谱鉴别法：取石斛药材粉末及石斛水溶性多糖,与KBr研磨、压片,进行红外光谱鉴别；②分子量分布GPC检查法：分离柱：TSK-GELG2000(7.5mm×30cm 10μm), Agilent PL aquagel-OH 50 (8μm), Agilent PL aquagel-OH MIXED (8μm)三柱串联,示差折光检测器,流动相：3mmol/LNaAc,流速：0.8ml／min,柱温：35℃,进样量：30μl对分子量分布进行检查；③单糖组成GC分析法：色谱柱：Agilent DB-624(0.53mm×30m,3μm), FID检测器,柱温：210℃保持40min,进样口温度：210℃,检测器温度：230℃,恒流：5ml／min,载气：N2,分流比：10：1,H2：40 ml／min,空气：400 ml／min,尾吹：35ml／min,进样1μl对水溶性多糖中单糖的组成进行检查；④多糖含量测定法：采用分光光度法,以葡萄糖作为对照,于520nm波长测定石斛药材中还原糖和总水溶性糖的含量,计算总水溶性多糖的含量；⑤其他检查法：按照《中国药典》(ChP)有关规定,检查铁皮石斛灰分、酸不溶性灰分、浸出物。结果①不同产地不同品种的石斛药材粉末红外图谱未见显著性差异,不同产地石斛提取的水溶性多糖在指纹区959～956cm-1有差异；②不同品种、不同部位的石斛水溶性多糖的分子量分布情况,在色谱图上均表现为连续分布的单一的峰,计算得到的分子量大小虽略有差别,但在同一数量级,难以作为区分依据；③不同品种,不同产地的石斛水溶性多糖水解样品,均检测到阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,且甘露糖与葡萄糖峰面积之和占总面积的80%以上,其中厂家提供样品的甘露糖峰面积明显大于葡萄糖峰面积,而药房购得的石斛正好相反,经过聚类分析,基本能区分不同产地石斛；④还原糖含量测定：样品在0.063～0.168mg/ml范围内呈现良好的线性关系,回归方程：A=4.6296C-0.2073,相关系数：r=0.9995；三种不同浓度样品的平均回收率分别为100.0%、98.9%、101.0%,RSD分别为2.14%、2.75%、2.22%；重复性试验RSD为0.75%；稳定性实验RSD为0.36%,样品在60min内测定稳定。总水溶性糖含量测定：采用硫酸水解样品,最佳水解酸度为6mol／1,最佳水解时间为20min；样品在0.065～0.196mg／ml范围内呈现良好的线性关系,A=5.8318C-0.1730,相关系数：r=0.9996；三种不同浓度样品的平均回收率分别为97.2%、96.1%、97.5%,RSD分别为1.84%、0.73%、2.32%；重复性试验RSD为2.31%；稳定性试验RSD为0.65%,样品在60min内测定稳定。⑤总灰分最高含量为9.24%,平均6.80%；酸不溶物最高含量为0.86%,平均0.36%；照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法(ChP2005版附录XA)测定,用乙醇作为溶剂,比较了三批样品冷浸法和热浸法的浸出物含量,结果分别为6.8%、6.6%、7.9%和10.5%、11.4%、12.8%,采用热浸法得到的浸出物较多。结论建立的各种方法,可用于石斛药材的质量控制。2.不同采收期、生长期铁皮石斛中糖含量的动态变化规律目的确定石斛的最佳采收季节和生长期。方法采用3,5-二硝基水杨酸显色法,以葡萄糖为对照,于520nm波长测定不同采收期的石斛药材中还原糖和总水溶性糖的含量,计算总水溶性多糖的含量。结果不同的采收季节,以总水溶性糖及总水溶性多糖含量为分析指标,12月～3月期间较高,开花期(4～5月)明显下降,随后又开始回升；以折干率为分析指标,得率变化不大,可以不予考虑；在不同的生长期,总水溶性糖及总水溶性多糖总体呈现先升高后下降的趋势,中间会受开花期的影响而有所波动,1.5～2年生长期的铁皮石斛含糖量最高,而1.5年以前折干率较低,1.5年以后变化不大。结论综合考虑,铁皮石斛总水溶性糖及总水溶性多糖的含量受生长期和季节的双重影响；以1.5～2年间生长期,12-3月季节为最佳采收期。3.不同加工方法对铁皮石斛中糖含量的影响目的确定石斛的最佳加工方法及药用部位。方法同2。结果不同的加工方法对本品糖含量有一定的影响,风干的样品,其还原糖含量最低,总水溶性糖含量最高,灰炉烘干的样品总水溶性糖及总水溶性多糖含量最低；不同部位的总水溶性糖及总水溶性多糖,中部含量最高,上部和下部含量较低。结论以石斛水溶性多糖含量为指标,石斛风干茎的中部为最佳药用部位。