【摘 要】
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microRNAs（miRNAs）通常用作肿瘤标志物,参与肿瘤发生等病理过程的调控。MicroRNA-141（miRNA-141）是在人类细胞中发现的早期miRNA之一。它在多种癌症中均显着过表达,其正常表达与癌症的发生、发展密切相关。miRNA-141的准确快速检测对于疾病的早期诊断具有重要意义。检测miRNA-141的技术有很多,包括荧光、光电化学和电化学。电致发光化学发光（ECL）作为一种新
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microRNAs（miRNAs）通常用作肿瘤标志物,参与肿瘤发生等病理过程的调控。MicroRNA-141（miRNA-141）是在人类细胞中发现的早期miRNA之一。它在多种癌症中均显着过表达,其正常表达与癌症的发生、发展密切相关。miRNA-141的准确快速检测对于疾病的早期诊断具有重要意义。检测miRNA-141的技术有很多,包括荧光、光电化学和电化学。电致发光化学发光（ECL）作为一种新技术,以其独特的优点越来越受到人们的关注。为了提高miRNA-141检测的灵敏度、降低检测线、开发出稳定性高方法,利用ECL方法做了如下三个方面的工作:1、本实验筛选出一种新的无毒、生物相容性好的电化学发光体。以Zn-Ag-In-S（ZAIS）多元纳米晶体（NCs）为模型研究了NCs的ECL。水溶性ZAIS NCs可以用过氧化氢作为共反应物,产生有效的氧化还原ECL,而用ZnS壳涂覆ZAIS NCs可以减少ZAIS NCs的表面缺陷,使得ECL增强明显。采用无酶扩增来构建生物传感器,即运用杂交链式反应和催化发夹自组装,再通过循环扩增检测miRNA-141。研究结果表明,该生物传感器具有良好的特异性、稳定性和重现性。因此,该策略为建立高发光效率的ECL三元系统开辟了一条新途径。2、本文构建了一种基于Au-luminol和ZAIS/ZnS NCs作为信号探针的高效准确比率型ECL系统,用于检测miRNA-141,旨在提高生物传感器的灵敏度。用Au-luminol和ZAIS/ZnS NCs形成共振能量转移系统,Au-luminol起阳极ECL发射体的作用,ZAIS/ZnS NCs为阴极ECL发射体。ZAIS/ZnS NCs的负电位ECL响应可被Au-luminol吸收,形成猝灭。ZAIS/ZnS NCs和luminol共反应剂均为H2O2,减少了两种共反应剂的影响。由此一种超灵敏且稳定的“双电势”比例ECL传感器被构建。3、本文开发了一种新型的多路复用生物传感接口,并将其与可见的BPE-ECL比率测量法相结合,以显着改变封闭BPE上阳极和阴极的ECL信号,以实现对microRNA-141（miRNA-141）的高灵敏度检测。合成了高效的硫掺杂硼氮量子点（S-BN QDs）,它在BPE的阴极处发出可见的红光。结合阳极ECL发射器Ir（dfppy）2（bpy）PF6,实现了红绿比例ECL的视觉发射。此外,超小型WO3-x纳米点(WO3-x NDs)通过简便的水热法成功制备。由此产生的超小型WO3-x NDs在近红外区域（NIR）表现出强烈的表面等离子体耦合（SPC）吸收,以增强S-BN QDs的ECL信号,同时降低Ir（dfppy）2（bpy）PF6的阳极信号。然后,DNA上的特定位点被Zn2+识别,WO3-x NDs被带走,导致阴极信号降低,阳极信号恢复。将Au NPs引入电极形成三螺旋DNA,S-BN QDs和Au NPs之间的光谱重叠,导致形成共振能量转移（RET）机制,降低了阴极ECL信号,而Au NPs是阳极信号的放大器。这种生物传感器在生物医学研究和临床诊断中具有进一步应用的巨大潜力。
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