论文部分内容阅读
目的：研究不同浓度下咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethylester CAPE)对结肠癌HT-29细胞增殖的影响；观察CAPE对结肠癌细胞JNK（c-Jun-N-terminal-kinase）信号传导通路中相关基因桩蛋白（paxillin）表达的作用，寻找其作用靶点，进一步阐明CAPE抗肿瘤作用的分子机制。方法：体外培养人结肠癌细胞株（HT-29），取对数生长期细胞，将其接种于细胞培养瓶或培养板中，待细胞完全贴壁后，吸弃原培养液；依次加入浓度为(0μg/mL、2.5μg/mL、5.0μg/mL、7.5μg/mL、10.0μg/mL)的CAPE；采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察不同浓度的CAPE在不同时间段(24h、48h、72h)对HT-29细胞生长的抑制率；提取总蛋白，以Western blot法检测HT-29细胞中JNK及paxillin两种蛋白在不同浓度的CAPE作用下表达量的改变。结果：1.10μg/mL的CAPE作用72h后对HT-29细胞的抑制率达60.03%，明显高于2.5μg/mL作用72h后28.93%的抑制率(P<0.01)，也明显高于10μg/mL作用24h后36.74%的抑制率(P<0.01)；2．CAPE在(2.5～10.0)μg/mL浓度范围内对HT-29细胞的生长均有抑制作用,且呈现明显的剂量依赖关系和时间依赖效应；3．随着CAPE浓度的增加，JNK、 paxillin蛋白表达水平降低，10μg/mL的CAPE作用24h后JNK的IOD值为230.95±5.98，paxillin的IOD值为446.30±50显著低于2.5μg/mL组（P<0.01）。结论：1. CAPE可在体外抑制人结肠癌细胞HT-29的增殖，并在一定范围内呈浓度与时间依赖性；2. CAPE可下调JNK、 paxillin蛋白水平，从而抑制JNK-paxillin相关信号通路的传导，达到抑制结肠癌细胞增殖的作用。