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目的:(1)探寻抗纤灵方在中医理论方面治疗肾纤维化的理论根据;(2)观察抗纤灵经验方剂对5/6肾切慢性肾衰模型小鼠的作用;(3)从改善炎症因子表达的角度来探究抗纤灵方是如何有效阻断肾纤维化的形成;(4)观察抗纤灵方对肾组织中致纤维化生长因子表达的影响,从而为抗纤灵方在临床的应用提供实验上的依据。 方法:(1)中医理论的探究:通过对古今多位名医和中医经典在治疗慢性肾脏病的经验方法和学术思想的总结和整理,去评价抗纤灵方治疗肾纤维化的理论根据。(2)动物实验的研究:56只C57BL/6J雄性小鼠(约18~22g),同时随机设立假手术组10只,余46只采用5/6肾切除制备慢性肾衰模型,2周后根据肌酐水平将手术组小鼠分为模型组、雷帕霉素及抗纤灵组,由于造模时和肌酐测定前死亡13只,余下33只按照肌酐水平分层分为模型组,雷帕霉素组及抗纤灵组,每组11只,雷帕霉素,抗纤灵组分别给予雷帕霉素(0.13 mg/100g),抗纤灵(2 g/100g)各0.5mL/每天灌胃治疗,模型组和假手术组等量蒸馏水,连续用药8周后处死小鼠,测定用药后各组肾功能肌酐、尿素氮,24hUpr的水平,取一部分肾脏组织进行HE、Masson染色,观察肾脏病理变化情况;另一部分肾组织用Western blot法测定肾组织IL6、NF-κBp65、TGF-β等因子表达水平,对肾组织中TIMP1mRNA、M-MP2mRNA、α-SMAmRNA、TNF-αmRNA的表达用实时荧光定量PCR法测定。 结果:(1)理论研究结果:在中医理论中,血瘀是慢性肾脏病、肾纤维化相关理论的重要组成部分,而活血化瘀大法是治疗肾纤维化一个重要方法。(2)动物实验部分研究结论:假手术组各项指标均接近于正常,与假手术组相比,模型组各项指标均有明显升高(P<0.01);抗纤灵组、雷帕霉素组血清Scr、BUN,肾组织IL6、NF-κ Bp65、TGF-β、Smad2/3、TIMP1mRNA、M-MP2mRNA、α-SMAmRNA、TNF-α mRNA及乏24hUpr水平较模型组明显降低(P<0.01或P<0.05),肾组织病理明显改善,且抗纤灵组疗效优于雷帕霉素组或与雷帕霉素组作用相似。 结论:(1)抗纤灵方能大幅度改善5/6肾切慢性肾衰模型小鼠的肾功能、24小时蛋白尿水平及肾组织病理损伤,具有良好的抗肾纤维化作用,并能明显降低肾脏纤维化相关指标。(2)抗纤灵方对抗5/6肾切慢性肾衰模型小鼠的机制反应可能跟降低炎症因子及致纤维化因子的表达有关。(3)在5/6肾切小鼠模型中,抗纤灵方在改善肾功能、肾纤维化及减轻肾脏炎症反应方面优于雷帕霉素组或与雷帕霉素组作用相似。