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活性氧簇在慢性肝炎、局部缺血/再灌注损伤、胆汁淤积、酒精性与非酒精性脂肪肝等肝脏疾病中起着重要的作用。通常在肝脏的代谢中会产生少量的自由基，细胞内超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶等抗氧化酶类可以及时清除它们。一旦自由基的产生超过机体清除能力则会导致细胞氧化应激损伤。由氧化应激造成的细胞、组织、器官乃至机体的损伤早就引起人们的高度重视。积极寻找和开发低毒高效的抗氧化剂药物，是世界医药学界的一项重大课题。
清胆胶囊作为已经上市的胶囊复方，对于胆石病的治疗显示出良好的治疗效果。研究证明，清胆胶囊可以有效预防豚鼠胆色素结石及胆固醇结石的形成。然而清胆胶囊是复方胶囊，成分复杂，难于阐明对胆石病治疗作用的机理。因此，我们从清胆胶囊中筛选到包括白藜芦醇、白藜芦醇苷、橙皮苷、大黄酚、大黄素与大黄酸在内的6种主要组分进行分析。
本课题建立人胚肝细胞LO2体外氧化应激模型，通过体外细胞增殖筛选，筛选出对过氧化氢(H2O2)和叔丁基过氧化氢t-BuOOH)氧化应激模型均具有治疗效果的单体化合物橙皮苷(Hesperidin)。研究表明，筛选出的低毒高效单体Hesperidin，显著抑制了H2O2与t-BuOOH诱导的氧化应激细胞生长抑制作用，并呈浓度和时间依赖性。Hesperidin降低了LDH的释放以及增加了线粒体膜电位，这些数据说明Hesperidin增加了LO2细胞生物膜(细胞膜与线粒体膜)的稳定性。Hesperidin降低了氧化应激细胞内ROS与MDA的含量，说明Hesperidin改善了H2O2与t-BuOOH造成的氧化应激程度。Hesperidin提高了氧化应激细胞胞内GSH含量与SOD的酶活，这些数据表明Hesperidin可以增加细胞抗氧化体系。通过Western Blot发现，Hesperidin可以激活Nrf2的核转位作用。结合MAPK信号通路抑制剂的使用，研究进一步发现，ERK/MPK信号通路的活化则直接激活了Nrf2的核转位，并因此增加了细胞内源性抗氧化酶HO-1基因的表达。综上所述，Hesperidin通过激活ERK/MAPK信号通路增加了Nrf2的核转位作用，核内增加的转录因子Nrf2进而激活了其下游靶基因HO-1的表达，改善了LO2胞内的氧化还原程度，并最终提高了氧化应激细胞的存活率。