【摘 要】
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目的观察电针干预对APP/PS1小鼠结肠及海马紧密连接相关蛋白Claudin-5、ZO-1和海马小胶质细胞及脂多糖-Toll样受体4/核转录因子-κB/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（LPS-TLR4/NF-κB/NLRP3）炎症通路蛋白表达的影响,以“微生物LPS-肠-脑轴”为核心探讨电针改善AD小鼠认知障碍的可能机制。方法18只5月龄雄性APP/PS1小鼠,被随机分成模型组、电针组,每组9
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目的观察电针干预对APP/PS1小鼠结肠及海马紧密连接相关蛋白Claudin-5、ZO-1和海马小胶质细胞及脂多糖-Toll样受体4/核转录因子-κB/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（LPS-TLR4/NF-κB/NLRP3）炎症通路蛋白表达的影响,以“微生物LPS-肠-脑轴”为核心探讨电针改善AD小鼠认知障碍的可能机制。方法18只5月龄雄性APP/PS1小鼠,被随机分成模型组、电针组,每组9只;9只同源同月龄雄性C57BL/6小鼠作为对照组。电针组选择“百会”、“大肠俞”、“足三里”通电干预,连续波,频率2 Hz,强度1 m A,每日干预1次,每次持续15 min,一周5次,连续干预5周;对照组、模型组给予电针组相同的抓取和固定,不做其他处理。采用Morris水迷宫评估小鼠的认知障碍;ELISA检测小鼠结肠、血清及海马的LPS含量;尼氏染色评估小鼠海马区神经元形态;免疫组化评估小鼠海马区离子钙接头结合调节分子-1（IBA-1）和脑组织β-淀粉样蛋白（Aβ）的表达;透射电镜评估小鼠肠屏障及海马血脑屏障的紧密连接的变化;western blot测定小鼠结肠及海马的紧密连接相关蛋白Claudin-5、ZO-1,海马TLR4、NF-κB、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）、白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的相对表达量。结果相对于对照组,AD模型组小鼠的逃避潜伏期显著增长（P＜0.01）,跨越目标平台的平均次数显著下降（P＜0.01）,第3象限的停留时间所占百分比显著减低（P＜0.01）,结肠、血清及海马LPS含量显著增高（P＜0.01）,海马CA1、CA3区神经元数量减少,损伤坏死神经元增加,海马区IBA-1表达增加（P＜0.05）,脑组织Aβ表达显著增加（P＜0.01）,肠屏障及血脑屏障紧密连接结构损伤,结肠及海马Claudin-5、ZO-1蛋白相对表达量显著降低（P＜0.01）,海马TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、TNF-α蛋白相对表达量显著增高（P＜0.01）;相对于AD模型组,电针组小鼠的逃避潜伏期缩短（P＜0.05）,跨越目标平台的平均次数显著上升（P＜0.01）,第3象限的停留时间所占百分比增高（P＜0.05）,结肠、血清（P＞0.05,P＜0.05）及海马LPS含量降低（P＜0.05）,海马CA1、CA3区神经元数量增多,损伤坏死神经元减少,海马区IBA-1表达减少（P＜0.05）,脑组织Aβ表达显著减少（P＜0.01）,肠屏障及血脑屏障紧密连接结构损伤减轻,结肠及海马Claudin-5、ZO-1蛋白的相对表达量增高（P＜0.01,P＜0.05）,海马TLR4、NF-κB、NLRP3、IL-1β、TNF-α（P＜0.05）、Caspase-1蛋白（P＜0.01）的相对表达量降低。结论电针改善APP/PS1小鼠认知障碍的机制可能与调节肠屏障及血脑屏障结构和功能,减少肠源性LPS的中枢易位,抑制海马区小胶质细胞及LPS-TLR4/NF-κB信号轴的过度激活,减轻海马区神经炎症反应有关。
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