除草剂草甘磷能够抑制小麦细胞色素P450的活性.在酵母细胞中表达的小麦细胞色素P450微粒体CO差异光谱在502nm有吸收峰,草甘磷与细胞色素P450结合为典型的Ⅱ光谱.这表明草甘磷中的N原子与细胞色素P450中的血红素产生了结合,其分离常数Ks为70μmol/L;草甘磷抑制细胞色素P450酶活性的IC<,50>为11μmol/L.这一抑制机理与先前人们研究的除草剂的增效剂即细胞色素P450的抑制剂作用机理不同,因而,这为开发磺酰脲类除草剂的增效剂提供了新的母体化合物.为研究小麦细胞色素P450特性,异源表达的小麦细胞色素P450微粒体经DE-52纤维素柱色谱法和Mono-Q快速蛋白纯化系统(FPLC)分离纯化后,以除草剂绿磺隆为催化底物时比活性达到512.3nmol min<-1>mg<-1>puotein,该酶被纯化1366.1倍,纯化后的细胞色素P450经SDS-PSGE检测为单一谱带,分子量为52.5kD.为了在体外快速研究除草剂的代谢,利用蚕丝素固定化了细胞色素P450.固定化细胞色素P450在连续使用10次以后,仍能维持原酶活性的80﹪;在4℃下贮存2个月,酶的相对活性保持在73.8﹪以上;此外,固定化细胞色素P450增强了酶对温度的稳定性和对pH的稳定性.固定化细胞色素P450与游离细胞色素P450对绿磺隆、醚苯磺隆具有相近的亲和常数.固定化细胞色素P450可方便、快速、稳定、持续地在微型反应器中进行除草剂的体外代谢研究.利用分子生物学,固定化技术构建方便、快捷的农药靶酶活性化合物体外筛选模型、代谢酶体外代谢模型.这一研究填补了中国进行高效筛选农药活性化合物的空白,满足了自动化进行农药体外代谢研究的需要;利用生物间农药差异代谢产物用于活性化合物筛选,发展农药体外代谢、活性化合物高效筛选与农药分子设计的偶合技术应用于新农药的创制中.可能成为创制新农药的一条捷径和获得活性化合物的源泉,有着广阔的研究前景.