海藻糖，又名覃糖，是由两个葡萄糖残基以α，α-1，1键联结而成的一种非还原性的双糖。其分子式为C₁₂H₂₂O₁₁，分子量（含两分子结晶水）为378.23。海藻糖在生物体内除作为结构成分、提供能量以外，最重要的作用是作为一种典型的应激代谢物，在干燥、低温、高渗等许多环境条件下保护生物体细胞内的蛋白质、脂类、糖类、核酸等组分不受破坏，保护细胞免受伤害。海藻糖应用非常广泛，在食品、医疗、分子生物学和农业方面都有重要意义。 本研究旨在对海藻糖进行定性定量分析基础上，从16种酵母菌中筛选出海藻糖产量较高的菌株，并通过诱变的方法优选出优良生产菌株，以提高海藻糖产量，且对此菌株的生长条件进行深入研究。 首先采用德国制GF254薄层层析板，展开剂为正丁醇：吡啶：水=15：3：3，点样量0.4μg，二次展开后用硫酸：甲醇=1：4溶液在105℃显色，在此条件下海藻糖灵敏度为0.04μg，较已报道的薄层层析法提高了近50倍。试验通过采用二次展开的方法，降低了试验的成本，为预制板的普及应用打下了基础。 为便于一般实验室对海藻糖进行定量检测，本研究采用硫酸蒽酮法、旋光法和薄层扫描法等传统方法对海藻糖进行了定量检测研究。结果表明，硫酸蒽酮法相关系数为0.9821，可以应用于海藻糖的定量检测，但因其受样品中其他糖类成分的影响，必须用校正系数加以校正。为了能够准确定量从酵母中提取的海藻糖含量，针对酵母的提取液，分别采用旋光法和用质谱法进行了海藻糖的定量分析。结果表明，两者之间存在高度正相关，对应的回归方程为^Y=0.697X+0.2534（旋光度为因变量，液质联用仪测定的海藻糖含量为自变量）。薄层扫描法定量分析海藻糖的变异系数为10％左右，因此也可以作为样品中海藻糖定量检测方法。 分析方法确定之后，本研究即从实验室保存的12种酵母菌和从采自长白山温泉的土样、发酵蜂蜜中分离出的酵母菌中进行了高产海藻糖菌株的筛选。以酵母抽提液海藻糖含量为指标，筛选出海藻糖高产酵母B-15，经物理和化学相结合的诱变结果，最终筛选出高产酵母ZY-D-10，其菌体内海藻糖含量为155.23mg／g，比出发菌株提高0.8倍。 继而对这一高产菌株从温度、培养时间和pH值等生长条件进行了研究，最后确立酵母菌ZY-D-10培养条件为培养温度32℃，培养时间27小时，初始培养吉林农业大学硕士学位论文.海藻枪分析方法以及高产海旅搪酵母菌株的筛选研究基PH值为6 .5。经上述条件培养后菌体海藻糖含量为1 70.7mg/g，比出发菌株提高了9 9.4%。 最后，本研究对诱变菌种的发酵液进行了检测，结果检测出高含量（1“.4mg/g）的海藻糖，与酵母zY一D一10胞内海藻糖量接近，这是本研究的新发现。发酵液中海藻糖是菌体生长过程中代谢产生的，还是菌体死亡后溶出的，还有待于进一步研究.但是，无论是哪一种原因，这一发现都将为海藻糖的生产提供全新的途径。 综上所述，本研究在总结以往研究成果的基础上，进行大量的试验和分析，在海藻糖的定量定性检测方面取得了一些突破.同时，试验又对酵母菌进行了诱变处理，筛选出高产菌株，并且首次从酵母发酵液中检测出较高含量的海藻糖，为这领域的下一步研究莫定了良好的基础.