实验研究表明,动物胚胎及其提取物可以影响肿瘤细胞的分化方向。胚胎的发育伴随着细胞的分化和凋亡,而肿瘤的发生则是细胞凋亡失衡的结果。在胚胎的发育过程中,胚胎本身合成的促分化因子会诱导胚胎细胞分化和凋亡,并引导胚胎向着一定的方向发育成成体。因此,近年来这种促分化因子在对肿瘤细胞的诱导分化和凋亡方面的应用引起了人们的关注。实验室前期工作已经确定了：动物胚胎粗提蛋白对肿瘤细胞的诱导凋亡作用具有普遍性。所以本文旨在从动物胚胎蛋白中寻找诱导肿瘤细胞凋亡的有效蛋白部分。蛋白质在低盐浓度下的溶解度随着盐溶液浓度升高而增加,称为盐溶；当盐浓度不断上升时,蛋白质的溶解度又以不同程度下降并先后析出,称为盐析,利用这种方法可以使蛋白质达到分离纯化的效果。盐析法是蛋白质粗提的重要方法之一,常用硫酸钠、氯化钠、磷酸钠和硫酸铵等中性盐。因硫酸铵具有稳定的化学性质、溶解度大等优点,所以实验采用硫酸铵盐析法对有效蛋白质进行提取,提取材料为不同发育时期的鸡胚胎。盐析法受蛋白质浓度、pH值、盐的性质、及温度等因素影响[2],因此,实验通过单因素试验设计,对蛋白质的提取温度、初始样品的浓度、缓冲液pH值、硫酸铵的饱和度这4个因素进行优化研究,旨在确定鸡胚胎有效蛋白提取的最佳方法。结果表明,鸡胚胎中所提取蛋白质的最佳条件为：提取温度4℃,初始样品浓度25%,缓冲液的pH值6.6,硫酸铵饱和度为60%。在该优化条件下提取不同发育时期的蛋白质,利用高效液相色谱仪将蛋白质进一步分离,并且收集不同峰形的蛋白质,冻干后溶解于一定体积的培养基中,用于体外培养的HepG2细胞的诱导实验。结果表明：分子量越大的蛋白质对肝癌细胞的诱导凋亡作用越强烈；此外,经一系列细胞凋亡的检测后,我们发现：早期胚胎中所提取的蛋白质对肝癌细胞的诱导效果明显优于晚期胚胎中的蛋白质。