【摘 要】
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吡啶甲酸铬作为营养补充剂和饲料添加剂已经得到广泛的应用,但其安全性问题一直存在争议。本研究通过向静脉内注射不同水平的稳定性同位素53Cr标记的吡啶甲酸铬来研究吡啶甲酸铬对仔猪细胞DNA及氧化的影响,以及吡啶甲酸铬在仔猪组织内的蓄积情况及其蓄积量与细胞DNA及氧化关系。本研究包括两部分:1.稳定性同位素53Cr标记吡啶甲酸铬的合成和分析。以0.4g金属53Cr为主要原料,先与2.4mL盐酸在85-9
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吡啶甲酸铬作为营养补充剂和饲料添加剂已经得到广泛的应用,但其安全性问题一直存在争议。本研究通过向静脉内注射不同水平的稳定性同位素53Cr标记的吡啶甲酸铬来研究吡啶甲酸铬对仔猪细胞DNA及氧化的影响,以及吡啶甲酸铬在仔猪组织内的蓄积情况及其蓄积量与细胞DNA及氧化关系。本研究包括两部分:
1.稳定性同位素53Cr标记吡啶甲酸铬的合成和分析。以0.4g金属53Cr为主要原料,先与2.4mL盐酸在85-90℃条件下反应得到2g三氯化铬。再将其溶于无水乙醇中,与3.23g吡啶甲酸在80℃条件下反应,得到1.2g紫红色粗品,最后经过精制即得到1g合成样品。用红外光谱(IR)、液相-质谱联用(LC-MS)、等离子体质谱(ICP-MS)的方法对合成样品进行定性定量分析。结果表明合成样品为53Cr标记吡啶甲酸铬,纯度98.56%,53Cr丰度97.86%。
2.静脉注射53Cr标记吡啶甲酸铬对仔猪细胞DNA及氧化的影响。选取体重15.0±1.0kg、健康的瘦肉型三元杂交(杜×长×大)仔猪30头,按体重、遗传背景相近的原则随机分成5组,每组6头,单笼个体饲养。每天早8:00~10:00分别对各组猪进行静脉注射,Ⅰ(对照)、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别注射0、8(适宜量)、200(25倍适宜量)、400(50倍适宜量)和800μgCr/d(100倍适宜量)的吡啶甲酸铬(分别以生理盐水注射液配制成不同浓度等体积的溶液),试验期14天。检测指标为组织中示踪剂铬的浓度、DNA链断裂(彗星试验)、血清和组织中抗氧化酶和脂质过氧化物、尿中8-OHdG。
结果:(1)吡啶甲酸铬在肝脏、肾脏、背最长肌蓄积量随着静脉注射吡啶甲酸铬水平的升高而增加,且在200μg以上各组达到显著(P<0.05)。(2)在肝细胞彗星形状指标上,除8μg、200μg组彗尾长显著低于对照组(P<0.05)外,各处理组彗星形状指标与对照组比较,差异均不显著(P>0.05);而从适宜量开始,各彗星指标值随着吡啶甲酸铬注射量的增大而升高,400μg和800μg组显著高于适宜量组(P<0.05)。(3)与对照组相比,仔猪的血清、肝、肾中MDA都无显著升高(P>0.05),除血清SOD和肾脏CAT活性显著下降(P<0.05)外,其它抗氧化酶也无显著变化(P>0.05)。但肾脏中,MDA水平随吡啶甲酸铬注射剂量的增加而升高,且800μg组显著高于适宜量组(P<0.05)。(4)各处理组猪尿液中的8-OHdG水平没有随着静脉注射吡啶甲酸铬水平而发生显著变化(P>0.05)。
结果表明:
(1)本试验剂量范围内(800μgCr/d,14天),吡啶甲酸铬在仔猪肝脏、肾脏和肌肉内显著沉积,肾脏中最多,其次为肝脏和肌肉。肝细胞DNA完整性和肾脏脂质过氧化与肝肾中铬浓度之间存在显著量效关系。(2)静脉注射不同水平吡啶甲酸铬未引起机体DNA氧化损伤和肝脂质过氧化。
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