目的研究人参皂苷Rg3对结直肠癌细胞及组织的作用,并进一步探讨其中的作用机制及临床意义。方法(1)选用LOVO、SW620和HCT116为实验细胞株,通过体外MTT(甲基噻唑基四唑)测定人参皂苷Rg3对肿瘤细胞增殖的作用。(2)通过划痕实验(wound healing assay)观察人参皂苷Rg3对肿瘤细胞迁移能力的影响。(3)通过使用实时定量PCR及流式细胞术评估人参皂苷Rg3对肿瘤细胞中干细胞标志物CD24,CD44和Ep CAM的m RNA及蛋白质表达的影响,并进一步使用平板克隆实验验证评估其克隆形成能力。(4)用人参皂苷Rg3处理肿瘤细胞后,使用实时定量PCR测定比较各肿瘤细胞血管相关生成因子的表达改变情况。(5)通过使用裸鼠BALB/c原位异种移植物模型,评估人参皂苷Rg3对结直肠癌细胞体内生长和血管生成的影响能力,并观察人参皂苷Rg3对5-氟尿嘧啶和奥沙利铂的细胞毒性影响作用。(6)通过免疫组织化学检测Rg3对结直肠癌预后影响因子B7-H1和B7-H3的蛋白质表达影响。结果(1)我们发现人参皂苷Rg3在体外和体内均可抑制结直肠癌细胞的生长和干细胞性。(2)人参皂苷Rg3在体外延缓了结直肠癌细胞的迁移。(3)人参皂苷Rg3可以下调血管生成相关基因的表达,并抑制结直肠癌异种移植物的血管化。(4)人参皂苷Rg3增强了5-Fu和奥沙利铂对体内原位异种移植肿瘤的细胞毒性。(5)此外,人参皂苷Rg3下调结直肠癌组织中B7-H1和B7-H3的表达,其高表达与结直肠癌患者的总生存(OS)降低相关。结论人参皂苷Rg3不仅抑制结直肠癌细胞的生长和干细胞性,还可以通过抑制血管生成和促进抗肿瘤免疫力来重塑肿瘤微环境。因此,人参皂苷Rg3可能是一种新的结直肠癌治疗药物。