三氯乙烯致敏豚鼠血清中相关细胞因子作用的研究

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目的通过检测并比较不同组别以及时间段豚鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和IL-12的水平,研究细胞因子在TCE致敏豚鼠皮肤损伤中的作用,探讨三氯乙烯药疹样皮炎的皮肤损伤机制。方法选用体重250~300g/只,白色雌性豚鼠,经适应性饲养一星期后,随机分成空白对照组、溶剂对照组(橄榄油)、TCE组和DNCB阳性对照组。定期测量豚鼠体重,监测豚鼠生长状况就健康状态;采用豚鼠最大反应试验(Guinea Pig Maximization Test, GPMT)方法建立豚鼠致敏模型,观察并记录豚鼠背部受试区的皮肤反应情况并进行拍照;依据《化学品毒性鉴定技术规范》(卫监督发【2005】272号)中规定的皮肤反应评分标准对豚鼠皮肤反应进行评分;当受试样品组动物皮肤反应积分≥1时,为皮肤致敏反应阳性,该动物被划分为致敏组,反之被划分为未致敏组。分别在豚鼠皮肤致敏实验24h和72h后抽取豚鼠血液并处死动物,制备血清,采用豚鼠细胞因子ELISA试剂盒测定血清中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和IL-12的含量。用SPSS12.0统计软件包对实验结果进行统计分析。结果1.在皮肤致敏反应试验中,空白组和橄榄油对照组均未见红斑或水肿, DNCB阳性对照组15只动物均出现红斑以及水肿反应,致敏率为100%;在TCE试验组的29只动物中有18只出现红斑,平均致敏率为62.1%。2.豚鼠血清中TNF-α和IL-1β检测结果:溶剂对照组TNF-α和IL-1β水平与空白对照组相比无统计学差异(P>0.05),而TCE 24h致敏组、TCE 72h致敏组、DNCB 24h组及DNCB 72h组血清TNF-α和IL-1β水平均较溶剂对照组高,且差异有统计学意义(P<0.05);TCE 24h实验组与TCE 72h实验组中,致敏组血清中TNF-α和IL-1β水平均较未致敏组高,且差异有统计学意义(P<0.05)。3.豚鼠血清中IL-6和IL-8检测结果:溶剂对照组IL-6和IL-8水平与空白对照组相比无统计学差异(P>0.05),且TCE 24h致敏组、TCE 72h致敏组、DNCB 24h组及DNCB 72h组血清IL-6和IL-8水平与溶剂对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);TCE 24h未致敏组IL-6水平较TCE 24h致敏组低,TCE 72h未致敏组IL-8水平较TCE 72h致敏组低,且差异均有统计学意义(P<0.05)。4.豚鼠血清中IL-10检测结果:溶剂对照组IL-10水平与空白对照组相比无统计学差异(P>0.05),与溶剂对照组相比较,TCE72h致敏组、TCE72h未致敏组及DNCB72h组血清IL-10水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);IL-10水平在TCE 24h致敏组与TCE 24h未致敏组、TCE 72h致敏组与TCE 72h未致敏组之间差异均无统计学意义(P>0.05);5. IL-12检测结果:溶剂对照组IL-10水平与空白对照组相比无统计学差异(P>0.05),与溶剂对照组相比较,各实验组(TCE24h致敏组、TCE24h未致敏组、TCE72h致敏组、TCE72h未致敏组、DNCB24h和DNCB72h组)血清IL-12水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);结论1. TCE对豚鼠具有致敏作用,致敏率为62.1%。2.细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10和IL-12参与TCE皮肤致敏反应,并在TCE皮肤致敏反应中发挥重要作用。3.细胞因子IL-6和IL-8在TCE致敏反应的某个时间段中发挥了一定作用。
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